[发明专利]一种高纯度莫西菌素的分离纯化法

说明书

本发明提供了一种高纯度莫西菌素的分离纯化法，将链霉素发酵产生的发酵液经固液分离，浸取后得到尼莫克汀浓缩液，经上保护、氧化、脱保护和胺化反应得到莫西菌素甲醇溶液（MX‑4），再经过制备型HPLC层析后，洗脱液经过浓缩、萃取分层、结晶、抽滤干燥得到的莫西菌素成品纯度在98%以上。该方法分离纯度高，使用溶剂量小，操作步骤少，产品收率高，适宜商业化大生产。

技术领域

本发明属于抗生素分离纯化技术领域，尤其是一种高纯度莫西菌素分离纯化方法。

背景技术

莫西菌素(Moxidectin)是一种新型抗寄生虫药，是由链霉菌发酵的单一成分的大环内酯类抗生素，莫西菌素可增大虫体神经突触后膜对Cl-的通透性，从而阻断神经信号的传递，最终使神经麻痹而导致虫体死亡。莫西菌素是通过两种不同的途径来增强神经膜对Cl-通透性的，其一是通过增强虫体外周神经抑制递质r-氨基丁酸(GABA)的释放；另一途径是引起由谷氨酸控制的Cl-通道开放。与其他大环内酯类抗寄生虫药的不同之处在于其成分单一，它在动物表皮和真皮中的药物浓度是皮下组织中的6倍，在动物胃肠道组织内的药物浓度明显高于肠腔中的浓度，因此有着更高的驱虫活性和长效、安全等特性，尤其对线虫(成虫和幼虫)和节肢动物，在极低的剂量下就有很好的抗虫活性。

莫西菌素是通过链霉素发酵产生产生的尼莫克汀(Nemadectin),再通过化学合成得到。美国专利US4916154A提供了一种制备莫西菌素的方法，即将发酵液经过固液分离，浸取后得到尼莫克汀溶液通过萃取，硅胶柱层析，凝胶层析得到纯度90％以上(HPLC)的尼莫克汀，然后通过上保护、氧化、脱保护、肟化反应得到莫西菌素，再经硅胶层析得到高纯度的莫西菌素。该方法能得到纯度为90％以上的莫西菌素，但工艺异常复杂，需要多次层析操作，溶剂用量很大，收率低，成本高。中国专利CN 101372492A提供一种制备高纯度莫西克汀的方法，即将预提纯的尼莫克汀溶液经过大孔吸附树脂层析，洗脱液通过二氯甲烷萃取浓缩，通过上保护反应，将上保护液通过大孔吸附树脂层析，洗脱液经过氧化、脱保护和肟化反应得到莫西克汀反应液，再经过大孔吸附树脂层析，得到纯度为93％以上的莫西克汀溶液。该方法同样需要多步层析，溶剂使用量大，操作繁琐，收率较低。

随着现代社会的进步以及人们对药品纯度要求越来越高，更高纯度的水平能够将药物制剂制成适当的剂型从而用于动物和人类。而具有更高纯度的莫西菌素可安全的用于多种多样的药物应用。因此，通过合适的方法制备出更高纯度的莫西菌素原料具有重要的现实意义。

发明内容

本发明提供了一种高纯度莫西菌素的分离纯化法，解决背景技术中提出的分离莫西菌素工艺复杂，需要多次层析操作，溶剂用量大，收率低，成本高等问题。

本发明的技术方案如下：

一种高纯度莫西菌素的分离纯化法，包括以下步骤：

(1)将链霉素发酵产生的发酵液经固液分离，浸取后得到尼莫克汀浓缩液，经上保护、氧化、脱保护和胺化反应得到待处理莫西菌素甲醇溶液(MX-4)，将莫西菌素甲醇溶液(MX-4)抽至反应釜内，加入流动相配成上注液，将上注液加入到制备柱中；

(2)向莫西菌素甲醇溶液中加入甲基丙烯酸甲酯，加热一定时间；

(3)进样：打开系统设备监视器，选择合适的在线过滤器，进行进料，根据单针进样量设定进料时间，并将冲洗出来的溶液排至废液接收罐，其中单针进量为200-250g；

(4)打开系统设备监视器，选择合适的在线过滤器，按吸附量进行上样，用有机溶剂水溶液进行洗脱，检测波长为240nm，当洗脱液主峰上升至平头拐点时，将组分收集阀切至洗脱液主流接收罐内，继续洗脱直至图谱下降至最低呈直线，用流动相平衡树脂后重复进样洗脱，如此重复多次，每罐收集2针主流液，混合均匀后取样检测，将检测合格洗脱液合并在一起；

(5)对检测合格洗脱液进行真空浓缩；