[发明专利]一种松毛虫质型多角体病毒和白僵菌杀虫悬浮剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种松毛虫质型多角体病毒的毒株，其特征在于：该毒株为马尾松毛虫质型多角体病毒；保藏名称为马尾松毛虫质型多角体病毒DpCPV-JL Dendrol imus punctatus cytoplasmic polyhedrosis viruses-DpCPV-JL，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址是中国武汉大学；保藏日期：2016年4月1日；保藏编号：CCTCC No.V201607。

2.一种球孢白僵菌菌株，其特征在于：该菌株为球孢白僵菌；保藏名称为球孢白僵菌Beauveria bassiana；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2013年08月13日；保藏编号：CGMCC No.7998。

3.一种松毛虫质型多角体病毒和白僵菌杀虫悬浮剂，其特征在于包括有效活性成分，所述活性成分为松毛虫质型多角体病毒悬液和球孢白僵菌粉，所述活性成分占总制剂的质量百分比含量的2％-30％。

4.根据权利要求3所述的松毛虫质型多角体病毒和白僵菌杀虫悬浮剂，其特征在于包括按照重量百分比的如下组分组成：

5.根据权利要求4所述的松毛虫质型多角体病毒和白僵菌杀虫悬浮剂，其特征在于包括按照重量百分比的如下组分组成：

6.权利要求4所述的松毛虫质型多角体病毒和白僵菌杀虫悬浮剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

准确称取权利要求1所述的质量百分比的各组分，依次加入100万-200亿PIB/mL的松毛虫质型多角体病毒悬液、球孢白僵菌、纳米级二氧化硅、芳香族氨基酸、精制荧光增白剂、木质素磺酸钠、氟啶脲、甘油和无菌水，再搅拌均匀分装，制得乳白色的松毛虫质型多角体病毒和白僵菌杀虫悬浮剂。

7.根据权利要求6所述的松毛虫质型多角体病毒和白僵菌杀虫悬浮剂的制备方法，其特征在于：制备松毛虫质型多角体病毒悬液的方法：

病毒粗品经两次差速离心，低速800rpm，离心5min，取上清；然后将上清高速：4000rpm，离心30min，取沉淀，去掉杂质，再经过一次蔗糖梯度离心纯化，经计数后置于4℃冰箱备用；

以棉铃虫或甜菜夜蛾作为替代宿主增殖该松毛虫质型多角体病毒，采用通用型人工饲料饲养宿主，将1×10⁶PIB/ml的病毒悬液均匀喷在养虫盒内的人工饲料上，感染4龄幼虫，从感染后的第4天至第10天收集患病死虫，然后松毛虫质型多角体病毒的分离、收集：将患病死虫匀浆捣碎，离心后过200目纱布去渣，计数后备用，制得松毛虫质型多角体病毒悬液；

所述通用型人工饲料配方包括按照重量百分比的如下组分组成：

8.根据权利要求7所述的松毛虫质型多角体病毒和白僵菌杀虫悬浮剂的制备方法，其特征在于：甜菜夜蛾或棉铃虫的饲养：

甜菜夜蛾的饲养：

将配制的人工饲料分装于经消毒的孵化盒中，将经人工饲料继代同步化的甜菜夜蛾适量卵块条粘于养虫盒盖背面上；将孵化盒放入24-28℃、相对湿度为70-80％湿度、光照L:D的值为12:12hr的养虫室，待幼虫孵化直至化蛹；收取健康蛹，在5-10％甲醛液中消毒、漂洗、晾干后放入养虫笼内，保持80％湿度。成虫羽化后，将5W白炽灯放在产卵笼的一端，引诱雌蛾产卵于白纸上。每天定时更换产卵纸，卵纸经5-10％甲醛消毒、漂洗、晾干，再根据卵纸上卵粒的密度，将卵纸剪成小片放入养虫盒中，进入下一次生活周期再循环；

棉铃虫的饲养：

面铃虫幼虫有自相残杀的生活习性，幼虫需要单头饲养，除此之外，其他饲养条件与甜菜夜蛾的饲养相同。