[发明专利]一种鼠李糖乳杆菌及其筛选方法和应用

说明书

本发明涉及微生物技术领域，具体公开了一种鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)，其在中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.14568。本发明公开的鼠李糖乳杆菌接种至酒糟中后，其可以利用酒糟中的糖类等物质为基础，进行乳酸发酵，乳酸具有很强的杀菌能力，能有效抑制有害微生物的活动，以及有机物的急剧腐败分解，因此，接种在酒糟中的鼠李糖乳杆菌可以在酒糟贮存中良好生长，并抑制酒糟贮存过程中霉菌等杂菌生长繁殖，从而实现酒糟原料贮存过程中营养组分的最大保持。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种鼠李糖乳杆菌及其筛选方法和应用。

背景技术

随着我国白酒技术的发展，白酒的年产量逐渐提高，作为白酒生产的副产物——酒糟的产量也越来越大，酒糟的再利用已成为白酒行业亟需解决的问题。近年来，我国白酒的年产量已经达到500-600万吨，白酒糟的产量更高达2100万吨。酒糟的妥善处理将直接影响到白酒生产企业的可持续发展，同时也关系到相关的国家节粮和环保政策的推广与落实。酒糟含有丰富的氨基酸、维生素和多种微量元素等，营养比较丰富，但其含水率高，如不加以处理，极易霉变腐败变质，这样不仅浪费了宝贵的资源，还会对周边的环境造成严重污染。因此，酒糟的再利用对我国废弃资源再利用和环境保护都具有十分重大的意义。

酒糟资源化方式中，厌氧消化技术是处理百万吨级酒糟最实用的技术途径之一。但由于酿酒工艺的自身要求，酒糟会大规模集中产生，考虑的建设成本等诸多问题，厌氧消化工艺无法短时间内消纳完集中产生的酒糟，为了保证厌氧消化工程发酵原料的可持续供应，酒糟需要一段时间贮存。目前，酒糟的主要贮存方式为自然堆放，但是自然堆放的酒糟容易霉变腐败，造成有机质损失严重，灰分增高；不仅如此，自然贮存过程中经历一系列生化反应，在一定程度上改变了其结构和成分，不利于后续厌氧消化的进行。

发明内容

本发明的第一目的就是针对现有技术存在的问题，提供一种能够用于酒糟贮存的鼠李糖乳杆菌，该菌可以作为生物添加剂单独接种于酒糟原料，改善酒糟的的贮存效果。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)，其在中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.14568，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101；保藏日期为：2017年08月25日。

所述鼠李糖乳杆菌的16SrRNA序列如SEQ ID NO.1所示。

具体的，所述的鼠李糖乳杆菌是从酒糟贮存场基地的渗滤液中分离纯化获得，渗滤液为酒糟原料贮存30天后，由贮存槽底部收集获得，具体酒糟贮存场的选择有很多。

具体的，所述的鼠李糖乳杆菌为革兰氏阳性菌，菌株呈杆状，长1.2～2.5μm，宽0.6～1μm。

本发明的第二目的是提供一种上所述的鼠李糖乳杆菌的筛选方法，其步骤如下：将采集的渗滤液按10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6的浓度梯度依次稀释，分别从各浓度的稀释液中吸取0.05mL，于MRS分离培养基平板均匀涂布，在30℃下恒温培养24h，镜检各菌落形态，挑取杆状菌落，反复划线分离纯化，获得该菌菌株。

具体的方案为，所述MRS分离培养基的制作方法为：称取蛋白胨10g、牛肉膏10g、酵母膏5g、葡萄糖5g、乙酸钠5g、柠檬酸二铵2g、吐温80mL、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.05g、磷酸氢二钾2g、碳酸钙20g，加水至1000mL，pH6.2-6.5，在120-122℃下高温灭菌25-30min。