[发明专利]基于Inkjet全自动在线液滴数字PCR装置有效
申请号: | 201711246949.X | 申请日: | 2018-01-16 |
公开(公告)号: | CN108004135B | 公开(公告)日: | 2021-03-05 |
发明(设计)人: | 林金明;张炜飞;内山一美 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | C12M1/38 | 分类号: | C12M1/38;C12M1/34;G01N15/00;G01N15/10;G05D27/02 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 徐宁;刘美丽 |
地址: | 100084 北京市海淀区1*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 inkjet 全自动 在线 数字 pcr 装置 | ||
1.一种基于Inkjet全自动在线液滴数字PCR装置,其特征在于,该装置包括:
一用于控制液滴的产生的Inkjet进样系统,其中,产生液滴中包裹着不同稀释浓度的模板DNA;所述Inkjet进样系统包括Inkjet装置、储液池和X-Y-Z移动平台,所述Inkjet 装置用于产生不同大小的液滴,所述储液池装有用于作为连续相的油,所述Inkjet装置浸入所述储液池的油中,所述X-Y-Z移动平台顶部固定设置所述Inkjet装置和储液池;
一用于对液滴进行单个反应单元内DNA扩增反应的毛细管连续流动式PCR扩增系统;
一用于对扩增后的液滴进行荧光信号的检测和计数的激光诱导荧光检测系统;
一用于控制液滴间的间距和液滴运输的液滴传送系统。
2.如权利要求1所述的基于Inkjet全自动在线液滴数字PCR装置,其特征在于,所述毛细管连续流动式PCR扩增系统包括毛细管和PCR加热模块,所述毛细管多圈周向缠绕在所述PCR加热模块外侧,所述毛细管的一端进口连接所述Inkjet装置的喷嘴,所述毛细管的另一端出口连接所述液滴传送系统,所述激光诱导荧光检测系统固定设置在所述毛细管的出口段。
3.如权利要求2所述的基于Inkjet全自动在线液滴数字PCR装置,其特征在于,所述毛细管进口段的长度为 20 cm,所述毛细管出口段的长度为 50 cm。
4.如权利要求2所述的基于Inkjet全自动在线液滴数字PCR装置,其特征在于,所述PCR加热模块包括三个弧形薄膜加热器、圆柱塑料芯体、三个恒温控制器、三个温度传感器和交流电供给装置;三个所述弧形薄膜加热器周向间隔固定设置在所述圆柱塑料芯体外侧构成三个恒温区,每一所述弧形薄膜加热器均包括两层薄铜片、一层塑料绝缘片和一层薄膜加热器,每一所述弧形薄膜加热器从内到外按照塑料绝缘片、第一层薄铜片、薄膜加热器及第二层薄铜片两两之间均采用双面胶紧紧粘贴成一体,三个所述恒温控制器分别连接相应所述薄膜加热器精准控制PCR扩增所需要的三个温度,三个所述温度传感器分别相应粘附在所述弧形薄膜加热器最外层的薄铜片表面,且每一所述温度传感器均相应连接所述恒温控制器。
5.如权利要求4所述的基于Inkjet全自动在线液滴数字PCR装置,其特征在于,PCR扩增所需要的三个温度即解链温度94 oC、退火温度48~68 oC以及延伸温度72 oC,所述毛细管从所述PCR加热模块底部开始沿着解链区带到退火区带再经延伸区带的顺序缠绕在所述PCR加热模块三个温度区带上,所述毛细管每缠绕一圈即形成一个PCR 循环。
6.如权利要求2~4任一项所述的基于Inkjet全自动在线液滴数字PCR装置,其特征在于,所述液滴传送系统包括压力泵、废液瓶和液滴进样控制系统,所述压力泵的进口连接所述毛细管的出口,所述压力泵的出口连接所述废液瓶,所述液滴进样控制系统用于根据设定要求控制所述压力泵和Inkjet装置的工作,进而控制液滴间的间距和液滴运输。
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