[发明专利]光镊光片显微成像装置和方法有效
申请号: | 201711246969.7 | 申请日: | 2017-11-30 |
公开(公告)号: | CN108072970B | 公开(公告)日: | 2020-05-05 |
发明(设计)人: | 刘辰光;郑婷婷;陈刚;谭久彬 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨工业大学;北京锐驰恒业仪器科技有限公司 |
主分类号: | G02B21/00 | 分类号: | G02B21/00;G02B21/18;G02B21/32;G01N21/64 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 李冉 |
地址: | 150001 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 光镊光片 显微 成像 装置 方法 | ||
1.一种光镊光片显微成像装置,其特征在于,包括:光片照明模块、光片探测模块、光镊聚焦模块和光镊轴向调焦模块:
所述的光片照明模块按照光线传播方向依次为:激光器一(1)、扩束镜(2)、柱面镜(3)、管镜一(4)和物镜一(5);
所述的光片探测模块按照光线传播方向依次为:物镜二(7)、滤光片(20)、收集透镜(8)、和CCD(9);
所述的光镊聚焦模块按照光线传播方向依次为:偏振分光镜(13)、管镜三(12)、管镜二(11)、和物镜三(10);
所述的光镊轴向调焦模块按照光线传播方向依次为:激光器二(19)、传导光纤(18)、准直镜(17)、偏振分光镜(13)、四分之一波片(14)、物镜四(15)和平面反射镜(16);
所述的光镊聚焦模块、光镊轴向调焦模块共用偏振分光镜(13);
被测样品(6)为培养皿中微米级或纳米级悬浮细胞或颗粒状待测样品;
所述的光镊轴向调焦模块中激光器二(19)发出激光,经过传导光纤(18)和准直镜(17)形成平行光,经过偏振分光镜(13)反射,再经过四分之一波片(14)和物镜四(15)出射到平面反射镜(16),光线经平面反射镜反射后再次先后经过物镜四(15)和四分之一波片(14),透过偏振分光镜(13)后进入光镊聚焦模块。
2.根据权利要求1所述的一种光镊光片显微成像装置,其特征在于光镊轴向调焦模块发射单色激光波长介于750nm-900nm之间,利用物镜三(10)夹持被测样品(6);光片照明模块发射单色激光波长介于350nm-700nm,利用物镜一(5)形成片状光照明被测样品(6)。
3.根据权利要求1所述的一种光镊光片显微成像装置,其特征在于偏振分光镜(13)反射光偏振方向同激光器二(19)入射光偏振方向相同。
4.根据权利要求1所述的一种光镊光片显微成像装置,其特征在于平面反射镜(16)轴向移动范围等于物镜三(10)的焦深。
5.一种光镊光片显微成像方法,该方法是基于权利要求1中所述的光镊光片显微成像装置实现的,其特征在于,包括以下步骤:
步骤a、激光器一(1)发出激发光,经过扩束镜(2)之后形成平行光,平行光束经过柱面镜(3)形成片状光,经过管镜一(4)、物镜一(5)透射后在被测样品(6)上形成片状光,所述的片状光激发样品焦平面发出荧光;
步骤b、激光器二(19)发出激光经偏振分光镜(13)过四分之一波片(14)和物镜四(15)透射到平面反射镜(16)产生反射激光,反射激光经四分之一波片(14)、偏振分光镜(13)、管镜三(12)、管镜二(11)和物镜三(10)形成聚焦光斑夹住被测样本中悬浮颗粒;
步骤c、设置平面反射镜(16)初始位置位于物镜四(15)的准焦面②,则光镊聚焦位置位于物镜三(10)的准焦面②’,设置平面反射镜(16)轴向扫描范围D1+D2,则对应光镊聚焦光斑轴向扫描范围为D1’+D2’,平面反射镜(16)位置与光镊聚焦位置对应关系为D1/D1’=D2/D2’=(M1M2)2;所述D1为平面反射镜(16)远焦位移,D1’为光镊聚焦位置近焦位移,D2为平面反射镜(16)近焦位移,D2’为光镊聚焦位置远焦位移,M1为物镜四(15)与管镜三(12)的焦距比值,M2为管镜二(11)与物镜三(10)的焦距比值;
步骤d、设置扫描层数为N,则平面反射镜(16)扫描步进为(D1+D2)/N,光镊聚焦光斑扫描步进为(D1’+D2’)/N,从而实现快速三维层析扫描。
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