[发明专利]一种南京椴株系高效繁育的方法

说明书

本发明公开了一种南京椴株系高效繁育的方法，剪取带腋芽的茎段作为外植体，经表面消毒后，接种于初代培养基中培养；剪取腋芽，转接于增殖培养基中，至腋芽诱导出不定芽；将不定芽分离成单个芽，然后转接于伸长培养基中；将伸长的不定芽移出组培室，在自然光照条件下炼苗；将炼苗后的伸长芽冲洗后，剪成适宜大小的微切段，然后进行生根预处理；将经生根促进液处理后的茎段形态学的下端，定植于营养基质中，在温室大棚中进行南京椴植株的成苗培养。本发明将南京椴伸长苗的扩大繁育过程、生根过程与驯化过程结合到一起，扩大了南京椴的繁育系数，提高了组培苗的存活率，加速了种苗繁殖的进程，有利于实现南京椴的工厂化育苗。

技术领域

本发明涉及一种植物快速繁殖技术，尤其涉及的是一种南京椴株系高效繁育的方法。

背景技术

南京椴(TiliamiquelianaMaxim)为椴树科，椴树属落叶乔木，我国特有树种。其树形美观，姿态雄伟，夏日黄花满树，花芳香郁，病虫害少，对烟尘及有害气体抗性强，是优良的园林观赏树种和蜜源植物；此外，南京椴木材材质优良，花和树皮均可入药，是一种集园林观赏、蜜源植物、用材树种和药用等多功能于一身的优良树种。南京椴产于我国江苏、浙江、安徽、江西等省份，但由于繁殖困难且生境遭到破坏，使得南京椴种群数量和个体数量己经逐渐衰减，甚至处于野生资源稀缺的状态。因此，开展南京椴繁殖技术研究迫在眉睫。

目前，南京椴繁殖多以种子和扦插繁殖为主，但由于南京椴种子产量低，种壳坚硬且种子深度休眠，致使种子发芽率低，且种子收集非常困难,使得种子繁殖在南京椴生产中的应用受到很大限制。此外，相关研究表明，南京椴的扦插繁殖也十分困难，插条易腐烂，扦插成活率较低，目前尚无扦插繁殖技术可以直接应用于南京椴生产上。植物组织培养技术因其具有繁育周期短，繁殖系数高，所需要的外植体材料少等优势，在植物的繁育中起着重要作用。目前，有关南京椴组培繁育的研究已有报道，但多以南京椴一到三年生实生苗茎段为材料，繁殖过程存在污染严重，繁殖效率低，组培苗后期驯化移栽过程繁琐且成活率低等问题，很难满足南京椴繁育的需求。针对南京椴繁育中所存在的诸多问题，急需开发一种南京椴株系高效繁育的方法。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种南京椴株系高效繁育的方法，能够有效的提高繁育效率，缩短生产周期。

本发明是通过以下技术方案实现的，本发明包括以下步骤：

(1)以多年生南京椴的枝条为材料，剪取带腋芽的茎段作为外植体，经表面消毒后，接种于初代培养基中，培养5～10d，至腋芽萌发至长度0.5～1.0cm；

(2)剪取步骤(1)中的腋芽，转接于增殖培养基中，培养20～30d，至腋芽诱导出高度为1～2cm的不定芽；

(3)将步骤(2)中的不定芽分离成单个芽，然后转接于伸长培养基中，培养15～20d，至不定芽高度为3～5cm；

(4)将步骤(3)中伸长的不定芽移出组培室，在自然光照条件下炼苗5～7d；

(5)将步骤(4)中炼苗后的伸长芽用流水冲洗后，剪成适宜大小的微切段，然后置于生根促进液中进行生根预处理；

(6)将步骤(5)中经生根促进液处理后的茎段形态学的下端，定植于喷施有MS基本培养液的营养基质中，以互不重叠为原则，在温室大棚中进行南京椴植株的成苗培养。

所述步骤(1)中，南京椴的带腋芽的茎段取材于野外多年生南京椴植株的当年生幼嫩枝条的未木质化茎段。

作为本发明的优选方式之一，所述步骤(1)中，初代培养基为添加有0.1～1.0mg/LTDZ、0.05～0.5mg/L ZT、30g/L蔗糖和7.0g/L琼脂的MS培养基。