[发明专利]肺癌诊断标记物microRNA-4317及在药物和诊断试剂盒中的应用

说明书

本发明属于分子生物学技术领域，公开了一组用于非小细胞肺癌发生转移、预后或靶向治疗的分子标记物microRNA‑4317。本发明进一步公开了所述分子标记物在制备非小细胞肺癌发生转移、预后或靶向治疗诊断试剂或试剂盒中的应用。本发明还公开了microRNA‑4317在制备具有抑制肿瘤药物中的应用和microRNA‑4317的基因表达情况在制备具有抑制肿瘤预后或靶向治疗药物中的应用。本发明利用分子生物学技术，能够有效地进行分子水平检测来判断非小细胞肺癌患者发生转移、预后及靶向治疗的标志，进而为个体化治疗这些疾病提供便利。同时对后续临床研究的开展具有重要的指导意义。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体地说，涉及一组标志基因microRNA-4317作为非小细胞肺癌诊断标记物及在药物和诊断试剂盒中的应用。

背景技术

肺癌一直是最危险的恶性肿瘤之一,其高发病率和高病死率是导致当今国内乃至世界范围内癌症致死的主要原因。据病理类型将肺癌主要分为两大类：一类是小细胞肺癌，约占肺癌比例的15％；另一类是非小细胞肺癌约占85％。虽然针对肺癌的研究方面有一定进展,包括肺癌患者的早期诊断、术前辅助化疗、放疗甚至靶向治疗的应用,但肺癌发病隐匿，肺癌患者就诊时大多数已属于中晚期，错过了最佳治疗时机，加上缺乏敏感、特异、有效的诊断和治疗方法，肺癌患者总的5年生存率仍低至15％，即便就诊时为早期，但因复发率很高，治疗效果也不佳。据统计，每年全球因肺癌致死的患者超过100万,并且以每年120万的新发肺癌病例递增，对人类健康和生命造成严重威胁。在我国的大部分地区，肺癌的发病率和死亡率呈持续上升趋势,男女肺癌发病率和死亡率居各类癌症榜首，若不采取相应的措施加以控制，到2025年我国预计将成为全球第一肺癌大国。因此探索有效地诊断、治疗以及预防肺癌的方法尤为重要。

利用分子生物学技术，能够有效地进行分子水平检测来判断恶性肿瘤患者发生转移、预后及靶向治疗的标志。进而为个体化治疗这些疾病提供便利。

MicroRNA是长约19-22个核苷酸的小片段单链非编码RNA。它通过有缺陷的碱基配对绑定其靶基因的3’非翻译区的互补序列来控制基因表达，从而使靶基因在转录或者翻译水平表达下调。近来microRNA成为从生长发育到癌症等很多病理生理过程的重要和革命性的保守调节因素。在不同的恶性肿瘤中，同一microRNA的作用可能不同。一个microRNA可以有很多属于不同通路的靶基因，而一个基因可以被几个microRNA调控。科学家发展技术来识别与肿瘤分期和患者预后相关的特异的基因表达标记，以改善预后和治疗。人们使用全面转录研究来识别以基因表达为基础的预后标识，但是，目前为止无一能应用于临床。与经典的mRNA表达谱相比，microRNA肿瘤表达谱似乎能够更准确地确定肿瘤亚型的分类。越来越多的证据支持实体肿瘤有特异的microRNA标记。与此同时，人们发现越来越多的microRNA的靶基因在肺癌发生中起重要作用，例如let-7、miR-34家族和miR-17-92簇。目前，科学家对microRNA的靶基因的识别仍然有限。在分子框架中，成熟microRNA带电后成为microRNA诱导的沉默复合体(miRISC)。该复合体含有Argonaute家族(一类庞大的蛋白质家族)，与通常位于靶基因3’端非翻译区的互补位点反应。目前的模型认为microRNA和其靶基因的反应起源于位于microRNA的5’端的一段被称为“种子序列”的6至8个核苷酸短片段。MicroRNA诱导的沉默复合体能够将靶基因再配置成特别间隔，在其中处理翻译阻滞和mRNA衰变。许多研究证实了microRNA诱导的mRNA失稳。联合计算预测，mRNA表达谱的测量代表了识别功能microRNA-靶关系的有效方法。在非小细胞肺癌中，许多不同的microRNA调节异常，可能有致癌或抑癌作用，并预测预后。识别能够预测肺癌患者预后的microRNA是一项重要发现，这表明microRNA可能在肿瘤进展中起重要作用。现行的临床病理分期在预测患者脑转移上有其局限性。具有相似临床病理特点或者相同分期的肺癌患者的转移发生和预后可能明显不同。分子标记物可以帮助医生鉴别高危患者，以便给予患者个体化治疗，从而改善生存。