[发明专利]一种路易斯安娜鸢尾的快速繁殖的方法

说明书

本发明涉及路易斯安娜鸢尾的快速繁殖体系的建立，通过对组织培养为建立路易斯安娜鸢尾快繁体系并对其进行初步优化，为大规模生产及脱毒改良和诱导新品种的产生奠定基础。

技术领域：

本发明涉及路易斯安娜鸢尾的组培技术，主要涉及路易斯安娜鸢尾的快速繁殖体系的建立。

技术背景：

路易斯安娜鸢尾(Louisiana Iris)为鸢尾科鸢尾属多年生宿根花卉，原产美国路易斯安娜州，现其杂交种广泛种植。路易斯安娜鸢尾具有极高的园艺观赏价值。它可在第8℃条件下保持叶片翠绿，在长江中下游地区为常绿植物；并且水陆两宜，能在水位低于50cm的水中生长，也能在旱地生长，在园艺应用中既可以旱地栽培，亦可布置水景；另外其花大色艳且花色丰富、茎杆粗壮、株型挺拔美观，具有很高的观赏价值。由于其在长江中下游地区可保持四季常绿，解决了江南地区冬季水景绿化的难题；并且其具有净化水质的作用，尤其适合污染水体和湿地生态环境的重建。路易斯安娜鸢尾在自然条件下结实困难，以分株繁殖为主，繁殖率较低，限制了品种的推广。且由于是分株繁殖，种质易受病毒侵染而退化，育种及诱导新品种的产生方面有一定的困难。在对路易斯安娜鸢尾的组织培养方面报道仅吴月燕等以路易斯鸢尾的花瓣、花蕾和花轴为外植体进行了愈伤组织的诱导和芽的分化实验。

发明内容：

本发明的目的为建立路易斯安娜鸢尾快繁体系并对其进行初步优化，为大规模生产及脱毒改良和诱导新品种的产生奠定基础。

本发明的目的通过以下方案实现：

路易斯安娜鸢尾外植体处理：将路易斯安娜鸢尾当年生幼苗自来水清洗后切去上部叶片，酒精消毒40s，升汞灭菌8min，无菌水冲洗6次，灭菌时必须不断地摇晃。上述操作皆在超净工作台无菌条件下进行。经过灭菌的芽用无菌滤纸吸干表面的水分，用解剖刀切为2mm大小的茎尖组织块接种到愈伤诱导培养基Ms+1.0mg/L 2，4-D+1.0mg/L KT+30g/L蔗糖+7g/L琼脂，p H 5.8。20d后可见茎尖长大，且在部分茎尖的基部产生淡黄色的愈伤组织。

将诱导得到的愈伤组织接种到分化培养基Ms+1.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+30g/蔗糖+7g/L琼脂，p H 5.8。培养20d后可见部分愈伤组织上分化生成小苗。以上培养条件均为：光照强度1500～20001x，光照12h/d，温度(25±1)℃。

不定芽诱导最佳培养基为Ms+(0.1-2.0)mg/L 6-BA+(0.1-1.0)mg/L NAA+30g/蔗糖+7g/L琼脂；不定根的发生最佳培养基为1/2MS+(0.1-2.0)mg/L NAA+(0.1-0.5g)/LAC+30g/L蔗糖+7g/L琼脂；试管苗不经炼苗直接出瓶，移栽最佳基质为泥炭。

本发明的优点为操作简便，配方简单，繁殖速度快。

具体实施方式：

实施例1

按照本发明的试验方法进行外植体的消毒处理，愈伤组织诱导培养以及分化培养，然后将获得的小苗分成两部分，一部分作为实验组，采用本发明的培养基进行不定芽的诱导、不定根的发生以及移栽。对照组路易斯安娜鸢尾小苗选择的不定芽诱导培养基中NAA的浓度设定为0.2mg/L，6-BA的浓度分别设定为0.5、1.0、2.0进行不定芽的诱导培养，通过一段时间的培养，结果显示本发明的培养基配方为最佳配方，对照组的几种培养基配比都不如本发明的培养基不定芽的诱导效果好。

实施例2

按照本发明的试验方法进行外植体的消毒处理，愈伤组织诱导培养以及分化培养，然后将获得的小苗分成两部分，一部分作为实验组，采用本发明的培养基进行不定芽的诱导、不定根的发生以及移栽。对照组路易斯安娜鸢尾小苗选择的不定根发生培养基中NAA的浓度设定为0.1、0.2、1.0、1.5，进行不定根的发生培养，经过一段时间的培养，结果显示本发明的生根培养基配方最佳，对照组的几种培养基配方生根数都不如本发明的培养基数量多。