[发明专利]β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ干扰核酸在制备抗胶质瘤血管生成制剂中的应用

说明书

本发明属于生物医学领域,涉及β1，4‑半乳糖基转移酶Ⅴ在制备抗胶质瘤血管生成制剂中的应用，本发明进行了β1，4‑半乳糖基转移酶Ⅴ对肿瘤血管生成的影响实验，结果显示，下调胶质瘤起始细胞中β1，4‑半乳糖基转移酶Ⅴ，能抑制胶质瘤起始细胞的成瘤能力，抑制胶质瘤组织中的血管密度；下调胶质瘤起始细胞中β1，4‑半乳糖基转移酶Ⅴ，能抑制胶质瘤起始细胞向血管内皮细胞的分化。进一步，所述的β1，4‑半乳糖基转移酶Ⅴ的下调可以用于制备抗胶质瘤血管生成制剂，为抑制胶质瘤血管形成提供新的有效手段，以及可以作为肿瘤病人预后的一个指标。

技术领域

本发明属于生物医学领域,涉及β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ干扰核酸的新的医用用途，具体涉及β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ干扰核酸在制备抗胶质瘤血管生成制剂中的应用。

背景技术

现有技术公开了持续的血管生成能力是恶性肿瘤的重要特性，它为肿瘤细胞的生长提供氧和营养物质。多种抗血管生成的治疗方案已在恶性胶质瘤中得到检验，是治疗脑瘤最有前途的措施之一，但是，实践显示，目前的肿瘤血管抑制剂并不能够完全抑制肿瘤的生长，甚至能够反向刺激肿瘤复发后的血管生成，这就需要对肿瘤的血管生成及调节作进一步详细的研究了解。

研究显示，脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤,可造成神经系统的功能障碍，甚至威胁患者的生命，研究表明，无论原发性或继发性脑胶质瘤,其持续性生长都必须依赖于新血管的生成。在正常的成人中，除了创伤愈合及生殖周期外，几乎所有的新生血管形成都是病理性的。因此将血管作为靶点，抗肿瘤血管形成疗法成为有效的抗胶质瘤手段。

细胞表面糖复合物中的糖链在肿瘤生长、粘附、迁移、侵袭和转移过程中起着重要的作用，目前多项研究表明，肿瘤细胞的恶性表型与细胞表面的糖链结构改变相关，在恶性肿瘤和转化细胞中N聚糖的外链分支Galβ1,4GlcNAcβ1,6Man链高表达，引起完全型N聚糖高度分支结构的形成，这是恶性转化细胞的一个重要特征。

β1，4-半乳糖基转移酶参与细胞糖蛋白N-聚糖的修饰，从UDP-半乳糖上添加半乳糖基到GlcNAcβ1->6Man上，形成Galβ1->4GlcNAcβ1->6Man链。目前发现β1，4-半乳糖基转移酶共有七个家族成员在肿瘤的发生和个体发育中起重要的作用；β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ是1998年克隆的β1，4-半乳糖基转移酶家族的成员之一；CD31又称为血小板-内皮细胞粘附分子,分子量为130kDa,可以标记血管内皮细胞，其用来检测微血管密度，能定量反应胶质瘤血管生成情况，用于评估肿瘤血管生成。

基于现有技术的研究现状，本申请的发明人拟提供β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ干扰核酸的新的医用用途，具体涉及β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ干扰核酸在制备抗胶质瘤血管生成制剂中的应用。

发明内容

本发明的目的在于基于现有技术的研究现状，提供β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ干扰核酸的新的医用用途，具体涉及β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ干扰核酸在制备抗胶质瘤血管生成制剂中的应用。本发明的抗胶质瘤血管发生的抑制剂，能为研发抗血管形成药物提供了新的靶点，对于胶质瘤的抗血管治疗具有重要提示意义。

本发明进行了β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ对肿瘤血管生成的影响实验，选取了人的胶质母细胞瘤标本中分离出的胶质瘤起始细胞；研究显示，下调胶质瘤起始细胞中β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ，能抑制胶质瘤起始细胞的成瘤能力，抑制胶质瘤组织中的血管密度；下调胶质瘤起始细胞中β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ，能抑制胶质瘤起始细胞向血管内皮细胞的分化。进一步，所述的β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ的下调可以用于制备抗胶质瘤血管生成制剂，为抑制胶质瘤血管形成提供新的有效手段，以及可以作为肿瘤病人预后的一个指标。

本发明提供了特异性抑制β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ基因表达的shRNA，用于抗胶质瘤血管研究，为实现上述目的，本发明将T698968细胞中的β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ用慢病毒载体介导稳定下调后发现血管形成能力下降，说明β1，4-半乳糖基转移酶Ⅴ干扰核酸可以抑制胶质瘤血管形成。