[发明专利]一种人工诱导雌核发育金鱼的头形性状纯种系培育方法

说明书

本发明涉及一种人工诱导雌核发育金鱼的头形性状纯种系培育方法。本发明采用青灰色雄性鲤鱼作为亲鱼，采集精液，稀释后利用常压室温等离子体的育种仪进行精子失活处理；将目标头形性状的雌性金鱼鱼卵排入瓷盆中，倒入失活精子，将受精卵铺洒在鱼巢上；将受精卵在细胞松弛素B溶液中持续浸泡20‑30分钟，之后自然孵化50～100天，弃去青灰色的金鱼苗个体及非目标头形性状雌核发育的金鱼苗，得到F1代金鱼；以F1代雌性金鱼、雄性鲤鱼为亲鱼，重复上述步骤，得到目标头形性状的F2代金鱼纯种系。采用本发明所述的方法得到的F2代金鱼纯种系为亲本用于育种生产,可繁殖出大量具有优良观赏头形性状的金鱼以满足人们的需求。

技术领域

本发明属于金鱼人工育种技术领域,具体涉及一种人工诱导雌核发育金鱼的头形性状纯种系培育方法。

背景技术

人工诱导鱼类雌核发育在理论研究、生产实践上均具有重要意义，其研究几乎涉及到所有的水产养殖鱼类，广泛用于鱼类品种的选育和遗传改良，性别决定机制的鉴别，基因定位及纯系建立等; 结合定向选育和杂交技术，培育出了许多具生长快、体型好、繁殖力强和抗病能力强等优良性状的品系，成为鱼类遗传育种研究工作最活跃领域之一。人工诱导鱼类雌核发育作为观赏鱼类的应用也是比较活跃的。如何稳定保持优良观赏鱼类的性状已成为观赏鱼类的遗传育种中亟待解决的问题。以雌核发育方法建立观赏鱼类的遗传纯系，可以快速选育出目标性状的观赏鱼类的纯种系，繁殖出大量具有优良观赏价值的目标性状的观赏鱼类以满足人们的需求。

金鱼（ Carassius auratus） 是目前国内观赏鱼市场中最普遍的消费品种，不但有品种繁多的体色，如有红色、红白、黄色、五花等，还有吸引人的多种多样的头形。以陈桢教授的命名，把金鱼头形区分为平头、鹅头和狮头3种类型。金鱼商品市场上常见的描述头形的名称1.狮头： 2.高头： 3.虎头： 4.鹅头： 5.寿星头： 6.猫狮头： 7.兰寿头： 8.皇冠头。有在这些头形中，有的是同一类型，在各地有着不同的名称。或者同一类型中有一些差异，也有着不同的名称。但金鱼培育传代的头形性状能稳定遗传的品系不多。因此，开展金鱼头形性状定向发育的遗传研究，不仅大幅度缩短优良观赏价值的头形性状选育的时间、提高育种效率，创建金鱼头形性状纯种系，提高金鱼的观赏的经济价值，具有观赏金鱼市场的应用前景。

发明内容

本发明以人工雌核发育技术是目前养殖生产中获得纯系品种的最佳捷径，运用人工雌核发育与金鱼头形性状选育相结合技术，为观赏鱼类优质金鱼头形性状的定向培育，选育出金鱼目标头形性状的观赏金鱼纯种系，繁殖出大量具有优良观赏价值的目标头形性状金鱼以满足人们的需求。

为实现本发明目的而采用技术方案如下：

1、人工排精

采用青灰色性腺成熟雄性鲤鱼作为亲鱼。先按每尾注射2 ～3 μg促黄体生成激素释放激素（LHRH-A1）；再以每kg鱼重注射500 ～800 U人绒毛膜促性腺激素（HCG）促排精,约10 h后采集精液。使用以60～80倍数的Hank's液对采集的雄性鲤鱼精液进行稀释，得到精子稀释液。

2、精子灭活

利用常压室温等离子体的育种仪( AＲTP)分批次对精子稀释液进行精子失活处理，得到失活精子液，合并后于-2～4℃低温避光保存备用；合并前每20μL失活精子液中加入5μL 0.6M 甘露醇、10μL Hank's 液。

所述的精子失活处理，其条件为:精子稀释液上样量20μL，处理输出功率125 W，气体流速10 L·min^{－ 1}，辐照距离2 mm，处理时间为20～60 s。

3、干法受精

选择不同于雄鱼体色的，具有目标头形性状的雌性金鱼作为亲鱼，当雌性金鱼达到产卵效应时间，轻挤雌性金鱼腹部就会有卵粒顺利流出，说明鱼卵成熟即可授精。