[发明专利]SPAG7基因在制备老年痴呆诊断制剂中的应用

说明书

本发明涉及SPAG7基因在制备老年痴呆诊断制剂中的应用，具体的涉及SPAG7基因及其表达产物在诊断和治疗老年痴呆疾病中的应用。为解决目前老年痴呆分子标记物稀缺的问题，发明人对老年痴呆患者及健康人对照外周血样本进行高通量测序，挑选出候选基因SPAG7，并通过RT‑PCR方法证实SPAG7基因与老年痴呆病具有很好的相关性，为临床基因诊断老年痴呆奠定基础。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及SPAG7基因在制备老年痴呆诊断制剂中的应用，更具体的涉及SPAG7基因及其表达产物在诊断和治疗老年痴呆疾病中的应用。

背景技术

老年痴呆又名阿尔兹海默(AD)，我国老年痴呆的发病率为每8人每年每千人，60岁以后该病的发病率和患病率都随着年龄的增加指数增长。由于我国人口老龄化问题的显现，老年人口数量的增多使得该种疾病成为影响我国老年人群健康和生活重要因素之一，而老年痴呆病仍然没有有效的治疗方法，提早诊断和治疗有助于延缓疾病进程，因此，寻找老年痴呆病诊断和预测相关的生物标记成显得非常重要。

现有的疾病进程诊断方法包括基于问卷的MMSE打分测试，以及针对Aβ淀粉样蛋白的神经元成像检测，还有一些有创方法比如通过分析脑脊液(CSF)中的相关生物分子(Aβ分子，tau蛋白等)来帮助进行AD的诊断，已有研究认为，通过脑脊液中AD生物标识物进行AD的诊断准确率较好，但是存在2个明显的缺点：费用过高，相比外周血相关的生物组织获取过程较难；获取脑脊液对病人造成的痛苦较大，还有可能留下后遗症。相比之下，外周血是一种比较容易获取的生物组织，研究外周血中AD相关的生物学变化就很具有现实意义，现有的专利中已经揭示部分和老年痴呆相关的分子标志物，如ZL2015104636167揭示的YAP1基因，ZL2015104635287揭示的EAPP基因，CN2016104739651揭示的10个与老年痴呆相关的致病基因，但是，上述基因还有待进一步验证。

为解决目前老年痴呆分子标记物稀缺的问题，发明人对老年痴呆患者及健康人对照外周血样本进行高通量测序，采用生物信息学方法进行基因筛选，挑选出候选基因SPAG7。现有文献研究表明SPAG7基因与口腔性口炎、咽炎和腺病等疾病相关，可作为上述疾病的诊断分子标志物。进一步，本发明进行了RT-PCR方法证实了SPAG7与老年痴呆具有很好的相关性，为临床基因诊断老年痴呆奠定基础。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测SPAG7基因和/或蛋白的试剂在制备老年痴呆诊断制剂中的应用。

为实现上述目的，本发明首先通过高通量测序结合生物信息学方法筛选到候选基因SPAG7，进一步通过分子细胞生物学方法验证了SPAG7与老年痴呆的关系：SPAG7与老年痴呆具有很好的相关性，可用于制备治疗老年痴呆制剂和/或老年痴呆诊断制剂，具有重要的临床应用价值。

进一步，所述的老年痴呆的诊断制剂包括用荧光定量PCR方法、基因芯片方法、测序方法检测老年痴呆外周血中SPAG7基因的表达。

荧光定量PCR法是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。荧光定量PCR的出现，极大地简化了定量检测的过程，而且真正实现了绝对定量。多种检测系统的出现，使实验的选择性更强。自动化操作提高了工作效率，反应快速、重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰。

基因芯片又称为DNA微阵列(DNA microarray)，可分为三种主要类型：1)固定在聚合物基片(尼龙膜，硝酸纤维膜等)表面上的核酸探针或cDNA片段，通常用同位素标记的靶基因与其杂交，通过放射显影技术进行检测。2)用点样法固定在玻璃板上的DNA探针阵列，通过与荧光标记的靶基因杂交进行检测。3)在玻璃等硬质表面上直接合成的寡核苷酸探针阵列，与荧光标记的靶基因杂交进行检测。基因芯片作为一种先进的、大规模、高通量检测技术，应用于疾病的诊断，其优点有以下几个方面：一是高度的灵敏性和准确性；二是快速简便；三是可同时检测多种疾病。