[发明专利]鉴别长毛对虾幼体和墨吉对虾幼体的分子标记引物及方法在审
| 申请号： | 201711273848.1 | 申请日： | 2017-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN108070663A | 公开（公告）日： | 2018-05-25 |
| 发明（设计）人： | 单斌斌;孙典荣;刘岩;杨长平;刘胜男;李腾 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院南海水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人： | 陈娟 |
| 地址： | 510300 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 对虾幼体 墨吉对虾 分子标记引物 鉴别 分子标记序列 测序 扩增 样本群体 基因组 样本群 引入 比对 | ||
1.鉴别长毛对虾幼体和墨吉对虾幼体的分子标记引物，其特征在于包括引物一和引物二：
引物一：16SF1：TTCAATCTACCTTTCAGT；
引物二：16SR1：TTTATCCTGGCTTATTCT。
2.用于权利要求1所述的鉴别长毛对虾幼体和墨吉对虾幼体的分子标记引物的方法，包括如下步骤：
1)选取长毛对虾幼体和墨吉对虾幼体，组成长毛对虾幼体和墨吉对虾幼体样本群，分别提取2个样本群体的DNA；
2)以步骤1)中的基因组DNA为模板，设计PCR反应体系分别进行扩增，得到长毛对虾幼体分子标记序列和墨吉对虾幼体分子标记序列；
3)对扩增产物进行纯化、测序，比对测序结果，鉴别其种类。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤2)中，所述PCR反应体系组成为：超纯水17.5ul，10×buffer 2.5ul，dNTPs 2ul，rTaq 0.15ul，DNA模板1ul，Primer各1ul。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤2)中，PCR扩增程序为：94℃预变性5min，然后94℃变性35sec，50℃退火35sec，72℃延伸35sec，进行38个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，
所述长毛对虾幼体分子标记序列为：
ATAACCGCGGCTGCTGGCACAAATTTTAGCCAGATATTTAATTAGGATCATCAATTCCAACTTACATTTATCTAATTAGTACTAGGTACTGAGAATTTATTTCTTAACGAAACCTCTTCCTTTAATTAATTCATTAACCTTTAGTATCTTTAACAATGAATCTTATTGTCACAATAAATTTTACATGTACCGTTGACCTAAAAATGAA。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，
所述墨吉对虾幼体分子标记序列为：
ATAACCGCGGCTGCTGGCACAAATTTTAGCCAGATATATAATTAGGATCATCAATTCCAACTTACATTTATCTAATTAGTACTAGGTACTGAGAATTTATTTCTTAATGAAACCTCTCCCTTTAACTGATTCACTAACCTTTAGTATCCTTAATAATGAATCTTATTGTCACAATAAATTTTACATGTACCATTAACCTAAAAATGAA。
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