[发明专利]一种南极磷虾抗氧化肽及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于生物发酵工程领域，涉及一种以枯草芽孢杆菌发酵处理南极磷虾获得富含维生素B12的抗氧化肽的方法，具体涉及一种南极磷虾抗氧化肽及其制备方法与应用。

背景技术

南极磷虾(Euphausia Superba)是地球上生物量最大、繁衍最成功的的生物之一，是一种重要的海洋新资源。我国对南极磷虾的开发尚处于初级阶段，主要体现在对磷虾油或虾青素的提取上，对于磷虾蛋白的回收利用相对较少。目前，南极磷虾粗蛋白多用作低值鱼饲料，且提取时多采用强酸强碱法，得率低，蛋白质结构被破坏，营养价值低；而由磷虾蛋白制得的磷虾肽具有多种生物活性，例如抗氧化、抑菌、抗疲劳等，在功能食品和化妆品领域拥有巨大的应用潜力。因此，寻找合适的工艺方法对磷虾蛋白进行加工是提高磷虾资源综合利用的关键。

本发明利用微生物发酵过程中产生的蛋白酶将磷虾蛋白降解为物活性肽，此举不仅可以大大提高磷虾蛋白的附加值，为保健品行业提供大量优质的原料，还可以为磷虾蛋白的深加工开辟一条新的途径。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用枯草芽孢杆菌发酵制备南极磷虾抗氧化肽的方法，从而提高南极磷虾蛋白质的综合利用率并提高磷虾蛋白产品的附加值。

本发明的另一目的在于提供由上述方法制备得到的南极磷虾抗氧化肽。

本发明的再一目的在于提供上述南极磷虾抗氧化肽的应用。所述南极磷虾抗氧化肽应用于化妆品领域、保健品和/或功能性食品领域，用于制备化妆品、保健品和/或功能性食品。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种南极磷虾抗氧化肽的制备方法，包括以下步骤：

(1)将脱脂南极磷虾粉、水和碳源混匀，调节溶液pH为7.0～7.5，灭菌，得到南极磷虾粉溶液；

(2)将枯草芽孢杆菌接种于液体培养基，29～31℃条件下摇床培养20～24h，得到枯草芽孢杆菌种子液；

(3)将枯草芽孢杆菌种子液与南极磷虾粉溶液进行混合，在30～40℃条件下摇床发酵35～42小时，离心，将上清液浓缩，干燥，得到南极磷虾抗氧化肽。

步骤(1)中所述脱脂南极磷虾粉与水的质量比为1:5～1:10；所述碳源的用量为脱脂南极磷虾粉与水的总质量的4％～8％；脱脂磷虾粉为磷虾粉经提取磷虾油后剩余的下脚料。

步骤(1)中所述碳源为麦芽糖、葡萄糖、乳糖、蔗糖、可溶性淀粉中一种以上；

步骤(1)中所述灭菌是指110～130℃条件下湿热灭菌25～45min，灭菌后降温到30～40℃；

步骤(2)中所述液体培养基通过以下方法得到：称取蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，氯化钠5.0g，加水定容至1000mL，调节pH至7.0～7.5，灭菌，即得液体培养基；所述灭菌是指110～130℃条件下湿热灭菌25～45min，灭菌后降温到30～40℃；

步骤(2)中所述枯草芽孢杆菌种子液中孢子的浓度为10⁶～10⁹个/mL；

步骤(2)中所述摇床培养的转速为100～200rpm；

步骤(3)中所述枯草芽孢杆菌种子液的用量为南极磷虾粉溶液体积的5％～10％；

步骤(3)中所述摇床培养的转速为100～150rpm；

步骤(3)中所述离心转速为2500～4000r/min所述浓缩为30～45℃旋转浓缩到30～45Bx(可溶性固形物含量为30-45％)，所述干燥为喷雾干燥。

所述枯草芽孢杆菌保藏号CICC10075,保藏单位：中国工业微生物菌种保藏管理中心。

发明所采用的脱脂南极磷虾粉丰富易得，上述方法可制备出高抗氧化南极磷虾肽，解决了南极磷虾粉综合利用率低的问题，同时也大大提高了产品的附加值。利用枯草芽孢杆菌进行发酵，制备的南极磷虾肽产品中肽的分子量在1000-7000Da之间，含量为50-80％，TEAC抗氧化能力为80-180μM Trolox/mg，ORAC抗氧化能力为50-120μM Trolox/mg，维生素B12的含量为9.3-17.5μg/kg。可作为有效添加成分用于保健品当中。

本发明通过枯草芽孢杆菌发酵过程中产生的蛋白酶降解脱脂磷虾粉，制备具有抗氧化活性的磷虾肽，最终得到磷虾肽的产品

与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：