[发明专利]马齿苋菌核青霉及其在制备抗青枯菌药物中的应用

说明书

本发明公开了马齿苋内生真菌中马齿苋菌核青霉在抗青枯菌中的应用，及其制备方法。本发明从马齿苋植株中分离得到了马齿苋菌核青霉，并进一步发现马齿苋菌核青霉发酵液的乙酸乙酯萃取物具有显著抑制青枯菌的作用，因此该菌核青霉可以应用到抗青枯菌的应用上。

技术领域：

本发明属于生物农药技术领域，具体涉及马齿苋内生真菌菌核青霉及其在防治青枯病害重的应用。

背景技术

青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)是一种能够引起植物青枯病的土传性病原细菌。由于青枯菌具有极其强烈的侵染性、全球性的地理分布和异常广泛的宿主范围，已成为破坏性最大的植物细菌性病害之一，一旦发病即可造成植物茎叶萎蔫下垂直至全部枯死，至今尚没有有效的防治办法，被称为植物的“癌症”。青枯菌可为害多种植物，近年报道其可以侵染 53个科200多种植物。青枯菌又是一个复杂的菌种，具有高度的变异性和适应性，而且其生理生化致病途径众多，这些复杂性致使植物青枯病难防难治，已严重威胁着热带，亚热带以及部分温带地区的农林业生产与发展。

植物内生菌是指在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部的微生物，主要包括真菌、细菌和放线菌，它们长期生活在植物体内的特殊环境中并与宿主协同进化，已形成互利的共生关系。研究表明，大部分的内生菌增加了其宿主的应激耐受性，还能提前启动植物的防御系统，增强植物的抗病性，而且内生真菌的侵入诱导植物防御性酶类活性上升，能产生一系列具有抗病作用的次生代谢产物。近些年的研究表明，植物内生菌分泌的抗生素是抑制和杀死病原菌的直接作用物质，可以直接利用内生菌的代谢产物防治植物病害。而且相对于植物而言，植物内生菌具有繁殖快，培养方便等显著优势，更利于工业化的生产应用，在农业领域中有着巨大的应用潜力。然而，通过查阅大量文献资料发现，利用马齿苋内生菌防治植物青枯病的研究却未见报道。

发明内容：

本发明的第一个目的是提供一株分离自马齿苋的菌核青霉新株系-马齿苋菌核青霉 (Penicillium sclerotiorum)jyscaumcx01，该菌于2017年10月11日保存于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，其保藏编号为：GDMCC No.60249。

本发明的第二个目的是提供马齿苋菌核青霉jyscaumcx01的发酵培养物在制备抗青枯菌 (青枯雷尔氏菌)药物中的应用。

所述的发酵培养物优选为是将马齿苋菌核青霉jyscaumcx01接种到PDA培养基中发酵而得到的发酵培养物。

进一步优选，所述的发酵培养物为发酵液，其是将马齿苋菌核青霉(Penicilliumsclerotiorum)jyscaumcx01接种到PDA培养基、察氏培养基、麦芽汁培养基或察氏酵母培养基中，摇床转速为50-220r/min，28℃培养5-12天，获得发酵培养物，经离心后上清液为发酵液。

本发明的第三个目的是提供马齿苋菌核青霉jyscaumcx011的发酵培养物的有机溶剂提取物在制备抗青枯菌药物中的应用；所述的有机溶剂为正丁醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、石油醚中的一种或两种以上的混合物。

所述的马齿苋菌核青霉jyscaumcx01的发酵培养物的有机溶剂提取物是将马齿苋菌核青霉jyscaumcx01接种到PDA培养基中发酵而得到发酵培养物，再将发酵培养物离心分离取上清液，即为发酵液，然后用有机溶剂萃取发酵液，有机溶剂萃取物经浓缩后即得马齿苋菌核青霉jyscaumcx01的发酵培养物的有机溶剂提取物。

本发明的第四个目的是提供一种抗青枯菌药物，其特征在于，含有有效量的马齿苋菌核青霉jyscaumcx01的发酵培养物的有机溶剂提取物作为活性成分。