[发明专利]基于金属有机框架材料作为信号探针的核酸适配体电化学传感器

权利要求书

1.一种基于金属有机框架材料作为信号探针的β-淀粉样蛋白寡聚体的核酸适配体电化学传感器，其特征在于，通过如下方法制备而成：

(1)金纳米粒子/Cu-MOFs复合物AuNPs/Cu-MOFs的制备：将均苯三甲酸在超声条件下溶解于甲醇中，并将CuSO₄·3H₂O溶解于H₂O中，然后将CuSO₄·3H₂O溶液逐滴滴入上述均苯三甲酸溶液中，在室温下静置反应；反应结束后利用离心的方法将沉淀物反复洗涤，真空干燥过夜得到Cu-MOFs；将Cu-MOFs粉末加入到AuNPs溶液中在室温下连续搅拌反应，反应结束后，将沉淀反复洗涤，真空干燥得AuNPs/Cu-MOFs粉末；

(2)核酸适配体在AuNPs/Cu-MOFs上的固定：将AuNPs/Cu-MOFs粉末分散在磷酸盐缓冲溶液中，将硫醇化的核酸适配体粉末溶解于上述AuNPs/Cu-MOFs溶液中，并在室温下孵育过夜得到核酸适配体溶液；

(3)夹心型核酸适配体传感器的构筑：将玻碳电极打磨抛光，清洗，将电极表面吹干，将其放入HAuCl₄水溶液中在恒电位下电沉积，得到金纳米花AuNFs修饰的玻碳电极；将AuNFs修饰的玻碳电极浸泡于硫醇化的核酸适配体溶液中室温孵育过夜；随后，用1-己硫醇溶液封闭电极表面，消除AuNFs的非特异性结合位点；然后将上述电极浸入不同浓度的Aβ寡聚体溶液中，在恒温水浴下使适配体与Aβ寡聚体进行特异性结合；再将电极浸泡于步骤(2)制得的核酸适配体修饰的AuNPs/Cu-MOFs溶液中进行孵育，使第二层核酸适配体与Aβ寡聚体进行特异性结合；用缓冲溶液洗涤后，制得夹心型核酸适配体电化学传感器；

所述硫醇化的核酸适配体的DNA序列为5′-HS-GCCTGTGGTGTTGGGGCGGGTGCG-3’。

2.根据权利要求1所述的基于金属有机框架材料作为信号探针的β-淀粉样蛋白寡聚体的核酸适配体电化学传感器，其特征在于，步骤(1)所述的进行AuNPs/Cu-MOFs复合物制备时，Cu-MOFs粉末和AuNPs溶液的比例为50mg：15mL。

3.根据权利要求1所述的基于金属有机框架材料作为信号探针的β-淀粉样蛋白寡聚体的核酸适配体电化学传感器，其特征在于，步骤(2)所述的核酸适配体溶液浓度为10μM。

4.根据权利要求1所述的基于金属有机框架材料作为信号探针的β-淀粉样蛋白寡聚体的核酸适配体电化学传感器，其特征在于，步骤(3)中核酸适配体修饰的电极与Aβ寡聚体的培养时间为3h；电极识别Aβ寡聚体后与核酸适配体修饰的AuNPs/Cu-MOFs的最佳培养时间为3h。