[发明专利]一种重组柯萨奇病毒B3的构建及其在抗肿瘤中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物科学技术领域，尤其涉及一种重组柯萨奇病毒B3的构建及其在抗肿瘤中的应用。

背景技术

柯萨奇病毒(Coxsackievirus)是一种肠病毒(enterovirus)分为A和B两类，是一类常见的经呼吸道和消化道感染人体的病毒，感染后人会出现发热、打喷嚏、咳嗽等感冒症状。

柯萨奇A9是一种常见致病病原体，常在夏季流行，常伴发脑膜炎及肺部损害，皮疹常见，但无特异性，可为散在性红斑、斑丘疹，初起于面颈部，后逐渐蔓延到躯干及上肢及掌跖。一般持续1-7d，可有短期发热，在出疹时则热退，并可发生水痘综合征，即高热3-4d，然后在红斑基础上发生1-2mm大小的水疱，呈向心性分布，皮疹不结痂。亦可伴发疱疹性咽峡炎，局部淋巴结肿大。此外亦可发生荨麻疹及紫癜，在病人咽喉分泌物、脑脊液、大便及血液中可分离此病毒。

柯萨奇病毒B型感染引起特征性传染性胸肋痛即所谓Bornholm′s病。可合并脑膜脑炎、心肌炎、发烧、Guillain-Ba-rré综合征、肝炎、溶血性贫血和肺炎。因此构建动物模型对于研制科萨齐病毒疫苗具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种重组柯萨奇病毒B3的构建及其在抗肿瘤中的应用。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

设计一种重组柯萨奇病毒B3的构建，将所述重组科萨奇病毒B3定量后接种实验动物，从而构建得到感染动物模型。

优选的，所述的实验动物为鼠类，优选为白鼠、乳鼠，日龄为30-45天。

优选的，接种方法为接触传播、空气传播、口服、静脉注射病毒接种、皮下注射或粘膜给药，并优选为空气传播或静脉注射。

优选的，重组柯萨奇病毒B3的接种量为1000copies/ml的纯化病毒悬液0.4-0.7ml。

优选的，病毒接种后，每隔10-15天收集实验动物的血液样本。

优选的，用RT_PCR方法测定体液和组织内的病毒载量。

优选的，在接受病毒接种后，用活检方法取淋巴结，福尔马林固定，石蜡包埋，常规病理组织切片处理后，染色，镜检。

优选的，感染试验动物后饲养2-3个月并处死，并抽血、收集脏器对模型进行评估。

优选的，一种重组柯萨奇病毒B3的构建，应用于抗肿瘤技术。

本发明提出的一种重组柯萨奇病毒B3的构建及其在抗肿瘤中的应用，有益效果在于：本发明小鼠模型构建过程相对简单，技术手段相对容易，构建成本低，不像转基因小鼠及嵌合体小鼠那样对技术要求高，构建过程复杂且成本高，所以本小鼠模型更易推广应用。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。

实施例1

一种重组柯萨奇病毒B3的构建，将重组科萨奇病毒B3定量后接种实验动物，从而构建得到感染动物模型。

的实验动物为鼠类，优选为白鼠、乳鼠，日龄为30天。

接种方法为接触传播、空气传播、口服、静脉注射病毒接种、皮下注射或粘膜给药，并优选为空气传播或静脉注射。

重组柯萨奇病毒B3的接种量为1000copies/ml的纯化病毒悬液0.4ml。

病毒接种后，每隔10天收集实验动物的血液样本。

用RT_PCR方法测定体液和组织内的病毒载量。

在接受病毒接种后，用活检方法取淋巴结，福尔马林固定，石蜡包埋，常规病理组织切片处理后，染色，镜检。

感染试验动物后饲养2个月并处死，并抽血、收集脏器对模型进行评估。

一种重组柯萨奇病毒B3的构建，应用于抗肿瘤技术。

实施例2

一种重组柯萨奇病毒B3的构建，将重组科萨奇病毒B3定量后接种实验动物，从而构建得到感染动物模型。

的实验动物为鼠类，优选为白鼠、乳鼠，日龄为35天。

接种方法为接触传播、空气传播、口服、静脉注射病毒接种、皮下注射或粘膜给药，并优选为空气传播或静脉注射。

重组柯萨奇病毒B3的接种量为1000copies/ml的纯化病毒悬液0.5ml。

病毒接种后，每隔12天收集实验动物的血液样本。

用RT_PCR方法测定体液和组织内的病毒载量。

在接受病毒接种后，用活检方法取淋巴结，福尔马林固定，石蜡包埋，常规病理组织切片处理后，染色，镜检。