[发明专利]高活性S-氰醇裂解酶及其应用在审
申请号: | 201711295257.4 | 申请日: | 2017-12-08 |
公开(公告)号: | CN108277216A | 公开(公告)日: | 2018-07-13 |
发明(设计)人: | 田振华;瞿旭东;程占冰;孙传民 | 申请(专利权)人: | 上海弈柯莱生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N15/60;C12P13/00 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 肖艳;徐迅 |
地址: | 200120 上海市浦东新区中国(上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 裂解酶 氰醇 高活性 大肠杆菌 氨基酸残基 催化活性 突变酶 野生型 突变 应用 | ||
1.一种突变的S-氰醇裂解酶,其特征在于,所述突变的S-氰醇裂解酶的第128位氨基酸残基发生突变,并且突变后的第128位氨基酸残基为N、L、V、G或Y,其中,氨基酸残基编号采用SEQ ID NO.1所示的编号。
2.如权利要求1所述的突变的S-氰醇裂解酶,其特征在于,所述突变的S-氰醇裂解酶的突变位点还包括第103位氨基酸残基;优选地,第103位氨基酸残基由H突变为L、I、V、M或C。
3.如权利要求1所述的突变的S-氰醇裂解酶,其特征在于,突变后的第128位氨基酸残基为N。
4.一种多核苷酸分子,其特征在于,所述多核苷酸分子编码权利要求1所述的突变的S-氰醇裂解酶。
5.一种载体,其特征在于,所述载体含有权利要求4所述的核酸分子。
6.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞含有权利要求5所述的载体或染色体整合有权利要求4所述的核酸分子。
7.一种制备权利要求1所述的突变的S-氰醇裂解酶的方法,其特征在于,包括步骤:
(i)在适合的条件下,培养权利要求6所述的宿主细胞,从而表达出所述的突变的氰醇裂解酶;和
(ii)分离所述的突变的氰醇裂解酶。
8.一种酶制剂,其特征在于,所述酶制剂包含权利要求1所述的突变的S-氰醇裂解酶。
9.权利要求1所述的突变的S-氰醇裂解酶、权利要求8所述的酶制剂的用途,用于制备具有光学活性的S-氰醇产物。
10.一种制备S-氰醇的方法,其特征在于,包括步骤:
(1)将权利要求1所述的突变的S-氰醇裂解酶与反应底物接触,进行催化反应,从而生成所述S-氰醇;
(2)分离并纯化所述S-氰醇产物。
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