[发明专利]一种cry1A基因定性PCR检测引物、检测方法和检测试剂盒在审
| 申请号： | 201711296185.5 | 申请日： | 2017-12-08 |
| 公开（公告）号： | CN107868844A | 公开（公告）日： | 2018-04-03 |
| 发明（设计）人： | 李亮;董美;宛煜嵩;金芜军;刘卫晓;兰青阔;温洪涛;武利庆;刘刚;柳方方;王迪 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司11279 | 代理人： | 叶立涛,周际 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 cry1a 基因 定性 pcr 检测 引物 方法 试剂盒 | ||
1.一种cry1A基因定性PCR检测引物，其特征在于，所述定性检测引物为：cry1A-aF，其核苷酸序列如序列SEQ ID No.1所示；cry1A-aR，其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.2所示。
2.一种抗虫基因cry1A定性PCR检测方法，其特征在于，按照如下步骤进行：
(1)DNA模板制备：提取待检测样品的DNA；
(2)试样PCR反应：以提取样品的DNA为模板，利用cry1A基因定性PCR检测引物配置反应体系，并进行PCR扩增。
(3)对照PCR反应：在试样PCR反应的同时，应设置空白对照、阴性对照和阳性对照。以水作为空白对照；以非转基因玉米材料中提取的DNA作为阴性对照；以转基因玉米MON810作为阳性对照。
(4)PCR产物电泳检测及凝胶成像分析。
3.根据权利要求2所述的cry1A基因定性PCR检测方法，其特征在于，所述cry1A基因定性PCR反应体系为：Green Master Mix缓冲液12.5μL，10μmol/L cry1A-aF引物1μL，10μmol/L cry1A-aR引物1μL，25ng/μL DNA模板2μL，用去离子水补至25μL。
4.根据权利要求2所述的cry1A基因定性PCR检测方法，其特征在于，所述定性PCR反应的条件为：94℃变性5min；94℃变性30s，64℃退火30s，72℃延伸30s，进行35次循环；72℃延伸7min。
5.一种cry1A基因定性PCR检测试剂盒，其特征在于，包括：Green Master Mix缓冲液、引物、阳性及阴性对照样品、去离子水；所述引物的核苷酸序列为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的序列。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院生物技术研究所，未经中国农业科学院生物技术研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201711296185.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
