[发明专利]一种荧光互补检测人趋化因子生物学活性的方法有效
申请号: | 201711296510.8 | 申请日: | 2017-12-08 |
公开(公告)号: | CN108191979B | 公开(公告)日: | 2021-01-01 |
发明(设计)人: | 周亚凤;王绪德;申兆兴;刘雪宾 | 申请(专利权)人: | 上海晶诺生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/02;G01N33/68 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 冯振宁 |
地址: | 200120 上海市浦东新*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 荧光 互补 检测 人趋化 因子 生物学 活性 方法 | ||
1.一种用于检测人趋化因子的生物学活性的细胞系,其特征在于,包含重组载体组合,所述重组载体组合为重组载体pCDNA3.1-hCXCR2-linker-VC和重组载体pCDNA3.1-β-Arrestin2-linker-VN的组合,所述细胞系的制备方法为:
先将重组载体pCDNA3.1-hCXCR2-linker-VC转染HeLa细胞,培养18~24h后,再将重组载体pCDNA3.1-β-Arrestin2-linker-VN转染上述细胞,用CXCL1、CXCL2或CXCL8处理转染了重组载体pCDNA3.1-hCXCR2-linker-VC和重组载体pCNA3.1-β-Arrestin2-linker-VN的上述细胞,对其进行荧光检测;
所述重组载体pCDNA3.1-hCXCR2-linker-VC插入有SEQ ID NO.3所示核苷酸序列;所述重组载体pCNA3.1-β-Arrestin2-linker-VN插入有SEQ ID NO.4所示核苷酸序列;
融合蛋白hCXCR2-linker-VC的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,融合蛋白β-Arrestin2-linker-VN的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;
融合蛋白hCXCR2-linker-VC的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;融合蛋白β-Arrestin2-linker-VN的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
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