[发明专利]细胞爬片用玻璃薄片表面的粘附处理方法在审
申请号: | 201711303962.4 | 申请日: | 2017-12-11 |
公开(公告)号: | CN109900895A | 公开(公告)日: | 2019-06-18 |
发明(设计)人: | 赵志恒;贾江涛 | 申请(专利权)人: | 北京和杰创新生物医学科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/533 | 分类号: | G01N33/533;G01N33/552 |
代理公司: | 天津三元专利商标代理有限责任公司 12203 | 代理人: | 胡婉明 |
地址: | 101111 北京市西城区经济技术开*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 玻璃薄片 玻璃薄片表面 清洗 氨基化处理 细胞爬片 醛基化 涂覆 粘附 氨丙基三甲氧基硅烷 细胞检测结果 醛基化处理 戊二醛溶液 洁净环境 氨乙基 纯化水 黏附 细胞 | ||
本发明提供一种细胞爬片用玻璃薄片表面的粘附处理方法,其包括:第一步清洗待处理的玻璃薄片;第二步在清洗好的玻璃薄片上涂覆一层N‑β‑氨乙基‑γ‑氨丙基三甲氧基硅烷溶液,进行氨基化处理;第三步在进行氨基化处理后的玻璃薄片上再涂覆一层戊二醛溶液,进行醛基化处理,得到醛基化玻璃薄片;第四步将醛基化玻璃薄片用纯化水清洗干净,放置在洁净环境下自然干燥后即可使用;有效提高细胞与玻璃薄片的黏附质量并能降低本底背景,有效提高细胞检测结果的有效性和准确性。
技术领域
本发明涉及生物体外诊断试剂检测用抗原载体处理方法,尤其涉及一种细胞爬片用玻璃薄片表面的粘附处理方法。
背景技术
目前,免疫学检测技术及其产品已广泛应用于重大传染性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤标志物、食品安全及优生优育等众多检测领域,在间接免疫荧光法检测试验中,对包被好抗原基质的检测是必不可少的,其承载抗原基质的玻璃薄片是非常重要的。目前检测用基质是在塑料载片或玻璃载片的固定位置包被某种抗原,每张载片上形成1至10份包被某种抗原的固定位置,这样,在检测环节可以同时开展1至10个病人的同步检测,由于玻璃薄片表面的粘附性对抗原基质的影响大,并会给间接免疫荧光法的检测带来诸多的不确定性,因此需要对细胞爬片用玻璃薄片表面的粘附处理方法进行改进。
发明内容
本发明的主要目的在于克服现有技术存在的上述缺陷而提供一种细胞爬片用玻璃薄片表面的粘附处理方法,有效提高细胞与玻璃薄片的黏附质量并能降低本底背景,有效提高细胞检测结果的有效性和准确性。
本发明的目的是由以下技术方案实现的。
本发明细胞爬片用玻璃薄片表面的粘附处理方法,其特征在于,包括以下步骤:第一步:清洗待处理的玻璃薄片;第二步:在清洗好的玻璃薄片上涂覆一层N-β-氨乙基-γ-氨丙基三甲氧基硅烷溶液,进行氨基化处理;第三步:在进行氨基化处理后的玻璃薄片上再涂覆一层戊二醛溶液,进行醛基化处理,得到醛基化玻璃薄片;第四步:将醛基化玻璃薄片用纯化水清洗干净,放置在洁净环境下自然干燥后即可使用。
前述的细胞爬片用玻璃薄片表面的粘附处理方法,其中,所述第一步的清洗待处理的玻璃薄片是把玻璃薄片一张一张的泡进含有洗涤灵的水中,洗去片子表面的油渍,浸泡一小时之后用流动的纯化水清洗干净;接着把纯化水清洗干净的玻璃薄片一张一张的放进铬硫酸溶液中,浸泡72±2小时;然后在鼓风干燥箱中烘干,鼓风干燥箱的温度控制在70±5℃;所述第二步的对清洗后的玻璃薄片进行氨基化处理是在清洗好的玻璃薄片的两面上涂覆一层N-β-氨乙基-γ-氨丙基三甲氧基硅烷溶液,该N-β-氨乙基-γ-氨丙基三甲氧基硅烷溶液的浓度为1%;然后将涂覆N-β-氨乙基-γ-氨丙基三甲氧基硅烷溶液的玻璃薄片放置在铜制的玻璃薄片架子上,处理温度控制在4℃±2℃,时间2小时;所述第三步玻璃薄片进行醛基化处理是在进行氨基化处理后的玻璃薄片的两面上再涂覆一层戊二醛溶液,进行醛基化处理,该戊二醛浓度为25%;涂覆戊二醛溶液的玻璃薄片放置在铜制的玻璃薄片架子上,处理温度4℃±2℃,时间3小时,得到醛基化玻璃薄片。
前述的细胞爬片用玻璃薄片表面的粘附处理方法,其中,所述该铬硫酸溶液的配置为在100ml纯化水中溶解重铬酸钾8±2g和无烟浓硫酸12±2ml;该铬硫酸浸泡液是储存在玻璃烧杯中。
本发明细胞爬片用玻璃薄片表面的粘附处理方法的有益效果是:可增加细胞爬片的质量,通过醛基与细胞形成共价键连接,提高细胞爬片的质量并降低本底背景,且醛基片的处理方法简便,把玻璃薄片在清洗干净后,通过1%的N-β-氨乙基-γ-氨丙基三甲氧基硅烷进行前处理,温度4℃±2℃,时间2小时之后继续进行25%的戊二醛进行醛基化处理,温度4℃±2℃、时间3小时,最后用纯化水清洗干净,在洁净环境下自然干燥后即可使用。
具体实施方式
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