[发明专利]一种油茶粕多肽、制备方法及在牛精液冷冻保存方面的应用

说明书

本发明公开了一种油茶粕多肽、制备方法及在牛精液冷冻保存方面的应用。本发明油茶粕的水解多肽具有多种活性，并且水解多肽的活性受油茶粕中蛋白水解位点影响：经胰蛋白酶水解产生的分子量为(5000u,3000u]的多肽具有提高牛冻存精液抗氧化能力的作用，可作为牛精液冻存保护剂降低氧化损伤；经碱性蛋白酶水解产生的分子量为(5000u,3000u]的多肽可以促进乏情母牛发情和受胎。而且，本发明水解多肽的制备方法简单，仅使用简单的粉碎、酶解、超滤、冻干即可，这些步骤都是可以在工厂中实现大生产化，易于实施。本发明实现了小果油茶粕的废物再利用，可以提高小果油茶粕的经济附加值。

技术领域

本发明属于畜牧领域，涉及一种油茶粕多肽、制备方法及在牛精液冷冻保存方面的应用。

背景技术

小果油茶(Camellia meiocarpa Hu.)是我国山茶属中栽培面积和年产量仅次于普通油茶(Camellia oleifer aAbel.)的主栽物种，主要分布于我国淮河、长江以南的福建、江西、广西、湖南、贵州等地。小果油茶又名江西子、小茶、鸡心子、小叶油茶、羊屎子等。果小、叶小、芽小，芽、苞片没有毛是其显著特征。

小果油茶粕是小果油茶提取油脂后得到的副产品。虽然，目前已有茶场将这些油茶粕脱毒后用作动物饲料，但是，由于工艺不成熟，绝大部分油茶粕仍然是当废料扔掉，或者堆腐后用作茶场的肥料，利用度低，附加值低。为了提高小谷油茶粕的利用度，提高其经济附加值，申请人对茶粕进行了深度研究与开发。

目前，尚未见小果油茶粕的水解多肽深度开发的报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种油茶粕多肽、制备方法及在牛精液冷冻保存方面的应用，既充分利用油茶粕，又提供了一种牛精液冷冻保存添加剂。

本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：

胰蛋白酶水解制备牛精液冷冻保存添加剂：

一种油茶粕多肽，以小果油茶粕为原料，经胰蛋白酶水解后，收集分子量在(5000u,3000u]范围内的肽段，冷冻干燥即得。

优选地，所述小果油茶粕指小果油茶的果实经过压榨处理或浸出法处理去除油脂后得到的固体残渣。

上述油茶粕多肽的制备方法，包括如下步骤：

步骤S1，将小果油茶粕粉碎至80-100目，加水浸泡，最后制成粕粉悬浮液；

步骤S2，加入胰蛋白酶酶解，酶解条件为：pH值，7.8-8.2；酶解温度，43-47℃；酶解时间，10-12小时；酶解结束后，加热使胰蛋白酶灭活，冷却至常温，静置取上清；

步骤S3，将上清液用脱脂棉过滤，收集滤液，冻干得粗品冻干粉；

步骤S4，粗品冻干粉用超纯水溶解，用不同截留分子量的超滤膜进行分离，收集分子量在(5000u,3000u]范围内的肽段，冷冻干燥即得。

优选地，所述不同截留分子量的超滤膜包括截留分子量分别为5000u、3000u的超滤膜。

优选地，还包括截留分子量10000u的超滤膜。

优选地，加热使胰蛋白酶灭活的方法为：90℃高温处理10分钟。

优选地，粕粉悬浮液优选130-170g/L。

优选地，所述胰蛋白酶的添加重量以粕粉重量计为2.5-3.5g/100g。

优选地，所述胰蛋白酶的酶解条件优选pH值8.0、温度45℃、时间11小时。

上述油茶粕多肽在牛精液冷冻保存方面的应用。

碱性蛋白酶水解制备促进乏情母牛发情和受胎的多肽：