[发明专利]一种滇黄精种苗的组培方法

权利要求书

1.一种滇黄精种苗的组培方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)选择滇黄精地下部分带芽根茎作为外植体，将剥下最外层芽鳞片的所述外植体进行灭菌处理，然后将灭菌后的所述外植体接种到MS培养基中进行培养；

(2)将无菌的所述外植体转接到诱导培养基中进行诱导培养得到分化出不定芽的外植体；

(3)将分化出不定芽的所述外植体转接到继代培养基中进行继代培养，得到滇黄精丛生芽；

(4)将所述滇黄精丛生芽转接至生根培养基中进行生根培养，得到滇黄精生根苗；

(5)将所述滇黄精生根苗进行炼苗。

2.根据权利要求1所述的滇黄精种苗的组培方法，其特征在于：步骤(1)中，在剥下所述最外层芽鳞片前，将带芽根茎从节间切下，去除须根后进行清洗和灭菌，再剥去外层顶芽鳞片。

3.根据权利要求2所述的滇黄精种苗的组培方法，其特征在于：所述清洗包括：用水冲洗掉表面泥沙，用毛刷除去残留泥土，然后在饱和洗衣粉水中浸泡20～30min，再用水冲洗30～60min；所述灭菌包括：先用75％酒精浸泡20～40s，再用混有1～2滴土温80的0.2％升汞摇晃灭菌10～15min，最后用无菌水清洗3～5次。

4.根据权利要求1所述的滇黄精种苗的组培方法，其特征在于：步骤(1)中，所述培养采用暗培养，所述培养的温度为23～27℃，所述培养的湿度为50～55％，所述培养的时间为3～5天。

5.根据权利要求1所述的滇黄精种苗的组培方法，其特征在于：步骤(2)中，所述诱导培养基包括MS培养基、苄氨基腺嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂；所述苄氨基腺嘌呤的浓度为1.0～3.0mg/L，所述萘乙酸的浓度为0.2mg/L，所述蔗糖的浓度为25～40g/L，所述琼脂的浓度为5～7g/L；

所述诱导培养包括：先暗培养7天，再在光照强度为1500～2000lx的条件下光培养40～50天，光照时间为8～10h/d；所述诱导培养的温度为23～27℃，所述诱导培养的湿度为50～55％。

6.根据权利要求1所述的滇黄精种苗的组培方法，其特征在于：步骤(3)中，所述继代培养基包括MS培养基、苄氨基腺嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂；所述苄氨基腺嘌呤的浓度为3.0～5.0mg/L，所述萘乙酸的浓度为0.2mg/L，所述蔗糖的浓度为25～40g/L，所述琼脂的浓度为5～7g/L；

所述继代培养包括：先暗培养7天，再在光照强度为1500～2000lx的条件下光培养30～45天，光照时间为8～10h/d；所述继代培养的温度为23～27℃，所述继代培养的湿度为50～55％。

7.根据权利要求1所述的滇黄精种苗的组培方法，其特征在于：步骤(4)中，所述生根培养基包括1/2MS培养基、萘乙酸、蔗糖、琼脂和活性炭；所述萘乙酸的浓度为0.5～1.5mg/L，所述蔗糖的浓度为25～30g/L，所述琼脂的浓度为4～6g/L，所述活性炭的浓度为0.2～0.3g/L；

所述生根培养包括：先暗培养15天，再在光照强度为1500～2000lx的条件下光培养45～60天，光照时间为8～10h/d；所述生根培养的温度为23～27℃，所述生根培养的湿度为50～55％。

8.根据权利要求1所述的滇黄精种苗的组培方法，其特征在于：所述诱导培养基、继代培养基和生根培养基的pH值为5.8～6.2。

9.根据权利要求1所述的滇黄精种苗的组培方法，其特征在于：步骤(5)中，所述炼苗包括：将所述滇黄精生根苗在营养杯中进行培养10～15天，所述培养的温度为25～30℃，所述培养的湿度为75～90％。

10.根据权利要求9所述的滇黄精种苗的组培方法，其特征在于：所述营养杯中的基质组分按质量百分比包括：酒精渣20～30％、蛭石25～35％、碎泥沙30～40％和鸡粪10～20％。