[发明专利]一种粉防己种苗的组培方法

说明书

本发明公开了一种粉防己种苗的组培方法，包括选取粉防己带腋芽茎段作为外植体，灭菌后接种到MS培养基中进行培养，然后进行诱导培养、继代培养、生根培养和炼苗。本发明通过诱导培养、继代培养和生根培养几个阶段的培养的组织培养方法及各组织培养阶段选择适宜的培养基，有效缩短粉防己育苗时间，提高粉防己种苗质量，在短时间内获得大量优质粉防己种苗，且该方法有效解决了粉防己繁育对块根需求量大、种子育苗发芽率低的问题。

技术领域

本发明涉及中药材栽培技术领域，具体而言，涉及一种粉防己种苗的组培方法。

背景技术

粉防己，又名汉防己、白木香，为防己科，千金藤属植物，多年生落叶缠绕藤本，茎纤细，有纵条纹。粉防己药用部分为粉防己干燥块茎，粉防己性寒，味苦，利水消肿，祛风止痛，用于水肿脚气、小便不利、风湿痹痛、湿疹疮毒、高血压症。

目前粉防己主要以野生采集为主，由于粉防己的药用价值较高，需求量越来越大，过度采挖以及野生环境的破坏，野生资源储量越来越少，只靠野生资源难以满足市场需求。

粉防己生长周期长，种子发芽率低，分根繁殖对块根需求量大，且容易造成品种退化、病虫害加重，经济效益差，难以形成大规模种植。粉防己种苗问题成为制约粉防己规模化种植的瓶颈。

发明内容

有鉴于此，本发明提供的一种粉防己种苗的组培方法，更好的克服了上述现有技术存在的问题和缺陷，该方法有效解决了粉防己繁育对块根需求量大、种子育苗发芽率低的问题，有效缩短粉防己育苗时间，提高粉防己种苗质量，在短时间内获得大量优质粉防己种苗。

一种粉防己种苗的组培方法，包括以下步骤：

(1)选择粉防己带腋芽茎段作为外植体，进行灭菌处理，然后将灭菌后的所述外植体接种到MS培养基中进行培养；

(2)将无菌的所述无菌外植体转接到诱导培养基中进行诱导培养；

(3)将经所述诱导培养的外植体转接到继代培养基中进行继代培养，得到粉防己丛生芽；

(4)将所述粉防己丛生芽转接至生根培养基中进行生根培养，得到粉防己生根苗；

(5)将所述粉防己生根苗进行炼苗。

进一步地，步骤(1)中，在进行所述培养之前，先后进行清洗和灭菌，再切下茎段得到长度为1.5～2cm的带腋芽茎段。

进一步地，所述清洗包括：用水清洗30～45min；所述灭菌包括：先用75％酒精浸泡20～40s，再用混有1～2滴土温80的0.1％升汞摇晃灭菌6～8min，最后用无菌水清洗3～5次。

进一步地，步骤(1)中，所述培养采用暗培养，所述培养的温度为23～27℃，所述培养的湿度为50～55％，所述培养的时间为2～3天。

进一步地，步骤(2)中，所述诱导培养基包括MS培养基、苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、蔗糖和琼脂；所述苄氨基腺嘌呤的浓度为0.3～0.5mg/L，所述吲哚丁酸的浓度为0.05～0.1mg/L，所述蔗糖的浓度为25～35g/L，所述琼脂的浓度为5～7g/L；

所述诱导培养包括：先暗培养7天，再在光照强度为1500～2000lx的条件下光照培养20～30天，光照时间为8～10h/d；所述诱导培养的温度为23～27℃，所述诱导培养的湿度为50～55％。

进一步地，步骤(3)中，所述继代培养基包括MS培养基、苄氨基腺嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂；所述苄氨基腺嘌呤的浓度为0.3-0.5mg/L，所述萘乙酸的浓度为0.05～0.1mg/L，所述蔗糖的浓度为25～30g/L，所述琼脂的浓度为5～7g/L；