[发明专利]金黄色葡萄球菌毒素LukS-PV在制备治疗实体肿瘤药物中的应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体是涉及一种金黄色葡萄球菌毒素LukS‑PV在制备治疗实体肿瘤药物中的应用。rLukS‑PV与C5aR高表达的实体肿瘤结合，使胞外的rLukS‑PV进入细胞，促使线粒体内的细胞色素C、促凋亡因子Smac/DIABLO释放到胞质，进而活化caspase‑9、caspase‑3，引起实体肿瘤细胞凋亡。本发明通过实验证实，rLukS‑PV可抑制乳腺癌等实体肿瘤细胞增殖，并诱导其凋亡，具有抗乳腺癌等实体肿瘤的效果。且这种抗肿瘤效果与细胞株C5aR mRNA表达量密切相关。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体是涉及一种金黄色葡萄球菌毒素LukS-PV在制备治疗实体肿瘤药物中的应用。

背景技术

女性乳腺是由皮肤、纤维组织、乳腺腺体和脂肪组成的，乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。乳腺癌中99％发生在女性，男性仅占1％。原位乳腺癌并不致命，但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散，容易脱落。癌细胞一旦脱落，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，危及生命。目前乳腺癌已成为威胁女性身心健康的常见肿瘤。中国专利申请CN 103705503 A公开了一种“Artoxanthochromane在治疗乳腺癌药物中的应用”，通过体外MTT抗肿瘤活性评价发现，Artoxanthochromane对人乳腺癌细胞株4T1、MCF-7、MDA-MB-231和MCF-7B的生长也具有显著的抑制作用，抑制这4株细胞生长的IC50值分别为0.69±0.24μM、0.77±0.41μM、0.68±0.36μM和0.72±0.36μM。

肝癌即肝脏恶性肿瘤，可分为原发性和继发性两大类。原发性肝脏恶性肿瘤起源于肝脏的上皮细胞，称为原发性肝癌，是我国高发的，危害极大的恶性肿瘤；。继发性或称转移性肝癌系指全身多个器官起源的恶性肿瘤侵犯至肝脏。中国专利申请CN 106868183A公开了一种WFDC21P在肝癌诊治中的应用，WFDC21P基因在肝癌患者中表达上调，且改变WFDC21P的转录水平可以改变肝癌细胞的增殖和克隆形成数，可将WFDC21P用于开发早期诊断肝癌的产品、治疗肝癌的药物。

近年来细菌毒素的抗肿瘤效应被广泛研究。细菌毒素具有与靶细胞膜受体结合的特异性和细胞毒性，已成为肿瘤靶向药物研究的热点。一些毒素已被证明具有抗肿瘤活性。如CNF1，由大肠埃希菌产生的细胞毒性坏死因子，可能成为神经胶质瘤新的治疗方法；白喉毒素能够抑制人宫颈癌和人肺腺癌细胞蛋白的合成，促进癌细胞的凋亡，并且白喉毒素还能够抑制Lewis肺癌小鼠模型中肿瘤细胞的生长、血管生成。如此等等都表明细菌毒素已有良好的应用前景。

PV-杀白细胞毒素(PVL)是金黄色葡萄球菌分泌的一种细菌毒素。PVL为双组份成孔毒素蛋白，由LukS-PV和LukF-PV构成，两个亚单位协同才能发挥穿孔和裂解细胞的作用。其作用方式是LukS-PV首先与靶细胞膜上的受体结合，LukF-PV再与之结合，两个组分围绕中心轴交替排列，最终形成一个环状结构的异聚体。此异聚体聚体可插入到靶细胞膜上，形成穿膜孔，从而对靶细胞产生特异性的溶解作用。

近年来，C5aR在恶性肿瘤细胞高表达已被越来越多地报道，但尚未发现一种药物可以靶向结合C5aR以发挥抗肿瘤作用，且该方面的相关理论知识未见披露。

发明内容

本发明的目的在于提供一种金黄色葡萄球菌毒素LukS-PV在制备治疗实体肿瘤药物中的应用，以克服传统实体肿瘤治疗药物所存在的不足之处，并揭示LukS-PV诱导靶细胞凋亡机制，及其治疗作用与细胞C5aR表达量之间的关系。

为解决本发明的技术问题，所采用的技术方案为：金黄色葡萄球菌毒素LukS-PV在制备治疗实体肿瘤药物中的应用，rLukS-PV与C5aR高表达的实体肿瘤结合，使胞外的rLukS-PV进入细胞，促使线粒体内的细胞色素C、促凋亡因子Smac/DIABLO释放到胞质，进而活化caspase-9、caspase-3，引起实体肿瘤细胞凋亡。