[发明专利]一种表面等离激元共振传感器、制备方法及定量检测方法在审

专利信息
申请号: 201711308116.1 申请日: 2017-12-11
公开(公告)号: CN108287149A 公开(公告)日: 2018-07-17
发明(设计)人: 张豫鹏;薛天宇;鲍桥梁 申请(专利权)人: 深圳大学
主分类号: G01N21/552 分类号: G01N21/552
代理公司: 广东良马律师事务所 44395 代理人: 李良
地址: 518060 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 表面等离激元 共振传感器 浸泡 制备 定量检测 检测 芯片 金纳米棒溶液 碱基互补 纳米材料 单链DNA 超低的 二维 水中 修饰 灵敏 应用
【说明书】:

发明公开一种表面等离激元共振传感器、制备方法及定量检测方法,制备方法包括步骤:A、将二维锑烯纳米材料溶于水中,得到浓度为0.01‑10mg/ml的锑烯水溶液;B、将表面等离激元共振传感器芯片浸泡在锑烯水溶液中,浸泡时间为0.01‑48小时;C、将步骤B处理后的表面等离激元共振传感器芯片浸泡在碱基互补的单链DNA修饰的金纳米棒溶液中,浸泡时间为0.01‑24小时,得到基于锑烯的表面等离激元共振传感器。本发明能够超灵敏的检测miRNA,并具有超低的检测极限。本发明可以解决目前降低miRNA检测极限困难的问题。本发明检测方法简单、经济、高效、稳定,具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域,尤其涉及一种表面等离激元共振传感器、制备方法及定量检测方法。

背景技术

miRNA是单链的小分子RNA,长度为20-24个碱基,控制着包括细胞凋亡、繁殖、器官发生、发育、肿瘤发生及造血等。自从1993年首次发现后,目前miRBase数据库共发布了9539种miRNA,其中miRNA155和miRNA21等在肿瘤发生时具有高表达,miRNA被认为是肿瘤发生的信号标志物,关于miRNA155和miRNA21的超灵敏度检测研究,对肿瘤等疾病的诊断具有重要意义。表面等离激元共振传感器(SPRbiosensor,或称表面等离激元共振生物传感器)具有实时监测、免标记、检测周期短、稳定性好等优点,可以实现蛋白质和DNA的免标记检测,但是,由于金膜作为SPR芯片对生物探针分子的固定量有限等因素,严重制约了SPR技术对miRNA等小分子的超灵敏度检测。

目前主要的检测miRNA的技术方法主要是:RNA印迹法、聚合酶链式反应(PCR)、微阵列芯片等,现有技术存在的主要问题是:(1)需要荧光分子标记,程序繁琐,(2)检测周期长,(3)检测灵敏度低。

因此,现有技术还有待于改进和发展。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种表面等离激元共振传感器、制备方法及定量检测方法,旨在解决现有技术中miRNA检测方式灵敏度低、周期长、程序繁琐等问题。

本发明的技术方案如下:

一种基于锑烯的表面等离激元共振传感器的制备方法,其中,包括步骤:

A、将二维锑烯纳米材料溶于水中,得到浓度为0.01-10mg/ml的锑烯水溶液;

B、将表面等离激元共振传感器芯片浸泡在锑烯水溶液中,浸泡时间为0.01-48小时;

C、将步骤B处理后的表面等离激元共振传感器芯片浸泡在碱基互补的单链DNA修饰的金纳米棒溶液中,浸泡时间为0.01-24小时,得到基于锑烯的表面等离激元共振传感器。

所述的基于锑烯的表面等离激元共振传感器的制备方法,其中,所述步骤A之前还包括:

预先对块状锑烯纳米材料进行球磨和超声剥离,再进行真空干燥得到二维锑烯纳米材料。

所述的基于锑烯的表面等离激元共振传感器的制备方法,其中,所述步骤B中,浸泡完成后,使用去离子水除去没有吸附的锑烯水溶液。

所述的基于锑烯的表面等离激元共振传感器的制备方法,其中,所述步骤C中,浸泡完成后,然后使用去离子水除去没有吸附的单链DNA修饰的金纳米棒溶液。

所述的基于锑烯的表面等离激元共振传感器的制备方法,其中,所述碱基互补的单链DNA修饰的金纳米棒溶液的制备方法如下:

将二硫键修饰的单链DNA分子水溶液加入到金纳米棒溶液中,静置过夜,然后加入磷酸缓冲溶液,静置一段时间后,真空离心浓缩,去除未连结的单链DNA分子。

所述的基于锑烯的表面等离激元共振传感器的制备方法,其中,最终将浓缩后的溶液分散在磷酸缓冲盐溶液中。

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