[发明专利]一种大鼠持续性高尿酸血症模型的复制方法

说明书

本发明属于实验模型构建技术领域，涉及一种大鼠持续性高尿酸血症模型的复制方法；其方法流程包括动物选取、适应性饲养、模型构建和模型应用四个步骤；该方法步骤具体为将选取的健康大鼠于清洁级的动物饲养室进行适应性喂养1周，将形态特征正常的大鼠用于模型的建立；针对形态特征正常的大鼠，每天于室温下用腹腔注射给药的方式，给予500mg·kg‑1的尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾，同时24h不间断的给予10％的果糖饮水以及充足的饮食。每日连续按对大鼠给药造模，持续给药3周，得到试样大鼠高尿酸血症模型；再将建立的大鼠高尿酸血症模型进行应用，得到具有典型疾病特征的高尿酸模型；用本发明建立大鼠持续性高尿酸血症模型的方法不仅操作简单，复制周期短，可使大鼠的血尿酸水平可显著提高，并且能够更好地模拟高尿酸血症的临床特征，具有良好的应用前景。

一、技术领域

本发明属于实验模型构建技术领域，涉及一种能构建长期稳定的大鼠高尿酸血症模型的方法。

二、背景技术

高尿酸血症是典型的因嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄减少而导致的疾病，以体内嘌呤代谢终产物尿酸的浓度高出正常水平2～8倍并长时间维持为特征。流行病学研究表示，体内血尿酸浓度长时间持续呈高水平时，会引发痛风、肾病、高血压和糖尿病等。而临床的常见的治疗高尿酸血症的药物如别嘌呤醇、非布索坦、苯溴马隆等均会出现不同程度的皮肤过敏、腹泻、肝功能异常等不良反应。因此，寻找更加合理和科学的高尿酸血症模型去应用于新型药物的筛选显得至关重要。

果糖是一种甜度最高的天然甜味剂，饮食中摄取的果糖主要来源于蔗糖、高果糖玉米糖浆。随着人们生活水平的提高，果糖的消耗量也在逐年升高，流行病学调查结果显示果糖饮料的消耗与血清尿酸水平的升高和高尿酸血症的频发有密切的关系。通过利用果糖造模，能够模拟临床常见的高尿酸病症病症，可以去探究果糖过量摄入与高尿酸血症之间的内在联系。由于啮齿类动物体内存在人类缺乏的尿酸酶，为了更好的模拟人体的实际情况和高尿酸血症的发病机制，故采用果糖和尿酸酶抑制剂别嘌呤醇结合的方式诱导高尿酸血症，可以在较短时间内形成稳定的动物模型。该模型可以用于广泛用于高果糖摄入所致高尿酸血病发病机理的探究以及抗高尿酸血症药物的筛选。

三、发明内容

本发明的目的在于克服目前常见的高尿酸血症造模技术所存在的缺点，建立了一种通过果糖联合氧嗪酸钾在短时间内建立稳定高尿酸血症模型的方法。本发明的技术方案为：

为了实现上述目的，本发明所述的高尿酸血症模型的构建方法，其方法流程包括以下步骤：

1)动物选取：选取体重为180-220g，年龄为6-8周龄的雄性清洁级SD大鼠，饲养于清洁级或SPF级的动物饲养室；

2)适应性饲养：将步骤1)中选取的SD大鼠于清洁级或SPF级的动物饲养室进行适应性饲养，适应性饲养期间观察大鼠的形态特征，将形态特征正常的大鼠挑选出来用于模型的建立；

3)模型的建立：将步骤2)中经过适应性饲养后形态特征无异常的大鼠，于SPF级的动物饲养室中24h不间断的给予10％的果糖饮水，并于室温下用腹腔注射的方式，给予500mg·kg-1的尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾。每日连续按对大鼠给药造模，持续给药3周。质量分数为10％的果糖溶液的配制方法：将饮用水中加入重量百分比为10％的果糖，搅拌混匀。；

4)模型的应用：对步骤3)中构建的大鼠高尿酸血症模型进行大鼠眼眶后静脉丛采血，加入含有肝素钠溶液的离心管中，在4℃、3000r/min的条件下离心5min，取500μL血浆的上清液，用尿酸试剂盒测定血浆尿酸得浓度，处死大鼠后迅速打开腹腔，摘除右侧肾脏，使用4％的多聚甲醛溶液固定，常规石蜡包埋后进行切片、HE染色，光镜(×200)下观察肾脏组织学变化。利用氧嗪酸钾联合果糖诱导大鼠高尿酸血症，得到的模型具有明显的高尿酸血症症状，血浆内尿酸水平出现显著升高并伴有明显的肾损伤症状。