[发明专利]一种扁座壳孢发酵生产β-甘露聚糖酶的培养基及方法

说明书

本发明公开了一种扁座壳孢菌发酵生产β‑甘露聚糖酶的培养基及方法，通过将发酵种子液接种于培养基，所述培养基的原料包括：葡萄糖2.5‑20g/L，牛肉浸膏2.5‑20 g/L，FeCl₃·6H₂O 0.01435‑0.1148mol/L，叶酸0.005‑0.04g/L；培养基初始pH=7.2‑8.1。该方法通过将发酵种子液接种于所述培养基中，250mL的三角瓶装液量为50mL，接种量2.5%，于25℃，转速150r/min下培养。发明的发酵方法具有发酵周期短；条件温和，易于控制；提供的用于扁座壳孢发酵生产β‑甘露聚糖酶的培养基，具有产率高，酯活力高等优点。

技术领域

本发明涉及真菌的发酵培养基及工艺，具体涉及一种扁座壳孢菌发酵生产β-甘露聚糖酶的培养基及方法。

背景技术

扁座壳孢菌 (Aschersonia placenta )隶属于子囊菌门、粪菌纲、肉座菌目、麦角菌科、座壳孢属，是一类常见的农林害虫重要寄生真菌。

β-甘露聚糖酶（β-mannanase）是一类重要的半纤维素酶类，其全称为β-1, 4-D-甘露聚糖酶（β-1, 4-D-mannan-mannanohydrolase，EC.3.2.1.78）以内切方式高效降解甘露寡糖、甘露多糖等含有β-1,4-D-甘露糖苷键的糖类，降解产物的非还原末端为甘露糖。目前，甘露聚糖在石油、清洁剂、保健、食品、饲料营养价值的提高、医药、纺织印染等行业有巨大的应用价值和前景。β-甘露聚糖酶不仅能够提供巨大的工业利润，在运用的同时还可以减少环境污染。在市场上，β-甘露聚糖酶的应用受到多方面因素的制约，例如制备成本高、活性低、副产物多等。据报道，微生物产β-甘露聚糖酶的开发和利用成为工业应用迫切需求的热点，因此研究座壳孢菌β-甘露聚糖酶具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种扁座壳孢发酵生产β-甘露聚糖酶的培养基及方法。该培养基用于发酵生产β-甘露聚糖酶时，具有产率高，活力高等优点；发酵方法具有发酵周期短、条件温和和易于控制等优点。为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种扁座壳孢发酵生产β-甘露聚糖酶的培养基，其原料包括：葡萄糖2.5-20g/L，牛肉浸膏2.5-20 g/L，FeCl₃·6H₂O 0.01435-0.1148mol/L，叶酸0.005-0.04g/L；培养基初始pH=7.2-8.1。

优选的，所述培养基的原料包括：葡萄糖20g/L，牛肉浸膏20g/L，FeCl₃·6H₂O0.0287mol/L，叶酸0.005g/L；培养基初始pH=8.1。

一种利用如上所述的培养基生产β-甘露聚糖酶的方法，包含以下步骤：

（1）将扁座壳孢接种种子培养基，制得发酵种子液；

（2）将步骤（1）中制得的发酵种子液接种于培养基，250mL 的三角瓶装液量为50mL，接种量2.5%，于25℃，转速150 r/min下培养。

步骤（1）所述种子培养基的原料含有：土豆200g/L，葡萄糖20g/L。

种子培养基的制备方法：200 g土豆熬汁（纱布过滤），加20 g葡萄糖，稀释至1000ml，1.01MPa，灭菌 20min。

本发明的有益效果在于：

1）采用本发明优化后的培养基，菌龄12h，发酵周期15h，发酵结果扁座壳孢产β-甘露聚糖酶为 330U/mL以上；

2）本发明的发酵方法有发酵周期短；条件温和，易于控制；提供的用于座壳孢发酵生产β-甘露聚糖酶的培养基，具有产率高，活力高等优点。

附图说明