[发明专利]一种与桃蚜对吡虫啉抗性紧密相关的基因

说明书

本发明公开了一种与桃蚜对吡虫啉抗性紧密相关的基因，其特征在于：该基因为GroEL，其序列为seq ID No.1。利用RNAi技术沉默GroEL基因，测定桃蚜GroEL基因低表达情况下对吡虫啉的敏感性，明确GroEL基因下调能否使桃蚜敏感品系对吡虫啉获得抗性，证明GroEL基因在吡虫啉抗性形成中的作用。

技术领域

本发明涉及一种桃蚜GroEL基因的新功能，属于基因工程领域。

背景技术

桃蚜是一种世界性分布的重要农业害虫，可危害50科400多种植物。除吸食植株汁液造成作物产量和品质下降外，还可传播多种植物病毒，常常造成农作物大面积绝收。由于桃蚜寄主植物十分广泛，可在多种作物上转移危害，一直以来对桃蚜的防治主要依靠化学农药。吡虫啉是近年来发展最快的新烟碱类杀虫剂，是世界范围内最有效，销售最好的杀虫剂。然而，与其他常规杀虫剂类似，在实际生产中吡虫啉的施用存在大量、过量等不科学不合理的现象。目前桃蚜抗药性的问题日趋严重，已引起世界各地研究者的关注。

抗性机理的研究是抗性治理的基础也是害虫防治的关键环节。迄今，关于桃蚜吡虫啉抗性的机理主要停留在生理生化水平。近年来随着现代生物技术的发展，人们发现害虫抗性机理的本质，不管是生理的或是代谢的，都有其基本的分子基础，抗性机制比以前认为的更复杂，认识到鉴定抗性相关的基因及其在抗性中的作用，对阐明抗性的本质极为重要，而且对于挖掘昆虫体内杀虫剂的新靶标具有重要意义。

GroEL属于分子伴侣，由昆虫内共生菌产生，在蚜虫体内含量很丰富，不仅存在于细菌细胞内，在蚜虫血淋巴中也具有很高的浓度。目前关于昆虫GroEL蛋白的研究主要集中在该蛋白与病毒传播的关系，其作用表现为保护病毒进入血体腔的过程中免遭降解，维持病毒在昆虫体内的持久性。而迄今尚未见该蛋白与抗药性相关的功能报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种与桃蚜对吡虫啉抗性紧密相关的基因，揭示GroEL基因一种新的功能。

本发明的技术方案是：一种与桃蚜对吡虫啉抗性紧密相关的基因，该基因为GroEL，其序列为seq ID No.1。

扩增上述的一种与桃蚜对吡虫啉抗性紧密相关的基因的引物对，所述的引物对为：seq ID No.2：5’TAATACGACTCACTATAGGGAGATGCTTCGTGGAGTTAATGTA3’；seq ID No.3：5’TAATACGACTCACTATAGGGAGAGACCAGTGCCTTCTTCTAC3’。

一种与桃蚜对吡虫啉抗性紧密相关的基因，由上述的引物对以桃蚜总RNA为模板进行PCR扩增得到。

所述的基因其序列为seq ID No.1。

本发明的有益效果：利用RNAi技术验证桃蚜GroEL基因在吡虫啉抗性形成中的作用，揭示GroEL基因一种新的功能。

利用RNAi技术沉默GroEL基因，测定桃蚜GroEL基因低表达情况下对吡虫啉的敏感性，明确GroEL基因下调能否使桃蚜敏感品系对吡虫啉获得抗性，证明GroEL基因在吡虫啉抗性形成中的作用。

附图说明

图1为 GroEL基因PCR扩增片段电泳检测图；

图2为桃蚜取食GroEL dsRNA后GroEL表达量。

具体实施方式

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 供试昆虫：供试桃蚜为本研究室采集饲养。