[发明专利]一种环孢菌素A及其类似物的液相合成方法

权利要求书

1.一种环孢菌素及其类似物的液相合成方法，其包括以下步骤：

1)合成羧基保护基化合物P；

2)以化合物P保护Fmoc-Ala-OH，得到Fmoc-Ala-OP；

3)依次脱除Fmoc保护基，偶联氨基酸，再脱除Fmoc保护基，偶联氨基酸直至合成Fmoc保护的直链肽；脱除Fmoc保护基得到直链肽H2N-D-Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-MeBmt-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-OP；

4)脱除羧基保护化合物P，得到H₂N-D-Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-MeBmt-Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-OH；

5)在溶液中进行环化反应，得到环孢菌素或其衍生物；

其中，化合物P结构如下所示

2.根据权利要求1所述的液相合成方法，在步骤3)中的依次偶联氨基酸为Fmoc-N-Me-Leu-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-N-Me-Leu-OH、Fmoc-Sar-OH、Fmoc-Abu-OH、Fmoc-MeBmt-OH、Fmoc-N-Me-Val-OH、Fmoc-N-Me-Leu-OH、Fmoc-N-Me-Leu-OH、Fmoc-D-Ala-OH。

3.根据权利要求1-2任一项所述的液相合成方法，在步骤3)中脱除Fmoc保护基的在Et₂NH/CH₂Cl₂(1:1,v/v)条件下进行脱除Fmoc反应。

4.根据权利要求1-3任一项所述的液相合成方法，在步骤3)中偶联氨基酸的反应条件为在缩合剂和碱剂的作用下进行缩合反应。

5.根据权利要求1-4任一项所述的液相合成方法，步骤2)的反应条件为将化合物P与Fmoc-Ala-OH在有机溶剂中混合，并碱剂作用下加热反应至完全，加入不良溶剂后析出Fmoc-Ala-OP。

6.根据权利要求5所述的液相合成方法，步骤2)中的加热温度为30-150℃，优选45-60℃。

7.根据权利要求1-6任一项所述的液相合成方法，步骤4)中脱除羧基保护基P的反应条件为在酸性溶剂条件性进行反应，优选反应条件为2％TFA。

8.根据权利要求1-7任一项所述的液相合成方法，步骤5)环化反应的反应条件为在缩合剂和碱剂条件下进行缩合环化反应。

9.根据权利要求4-8任一项所述的液相合成方法，缩合剂选自BTC、EDCI、EDC、DCC、DIC、HATU、HBTU、HOAt、HOBt、PyAOP、PyBOP等中的一种或几种组合来完成；

优选地，在步骤3)中偶联N-甲基化氨基酸Fmoc-Val-OH，Fmoc-Abu-OH和Fmoc-D-Ala-OH缩合剂选自BTC和HOAt的组合；偶联N-甲基化氨基酸Fmoc-N-Me-Leu-OH，Fmoc-N-Me-Val-OH和Fmoc-Sar-OH的缩合剂选自BTC；偶联Fmoc-MeBmt-OH缩合剂选自EDCI和HOAt的组合。

10.根据权利要求4-9任一项所述的液相合成方法，碱剂选自DIEA、NMM、TEA、吡啶、DBU或N-甲基吗啉、三甲基吡啶、二甲基吡啶。