[发明专利]马铃薯染色体Ⅺ末端抗低温糖化相关的QTL位点的SNP标记及其应用有效
| 申请号： | 201711321020.9 | 申请日： | 2017-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN107937591B | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 宋波涛;黄维;肖桂林;谢从华;柳俊;李春燕 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6869;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 深圳市铭粤知识产权代理有限公司 44304 | 代理人： | 孙伟峰 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 马铃薯 染色体 末端 低温 糖化 相关 qtl snp 标记 及其 应用 | ||
1. 一种马铃薯低温糖化抗性的检测方法，其特征在于，采用马铃薯抗低温糖化相关的主效QTL位点紧密连锁的SNP标记引物对不同基因型的马铃薯基因组提取物进行PCR扩增，将扩增产物用限制性内切酶SapⅠ进行酶切消化，酶切产物用1%的琼脂糖凝胶检测，并经DNA测序验证，所述PCR扩增引物如序列表SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；所述PCR扩增引物的靶向序列如序列表SEQ ID NO：3所示。
2.根据权利要求1所述的一种马铃薯低温糖化抗性的检测方法，其特征在于，PCR扩增体系：50ng/μl 的DNA模板1μl，10μM的上下游引物各0.5μl，2×Utaq PCR Mix 10μl，ddH2O8μl；PCR扩增程序依次为：95℃预变性3 min，然后12循环依次经过95℃变性30s、退火1min，每循环一次退火温度减少0.5℃、72℃延伸1min30s，随后23循环依次经过95℃变性30s、退火1min，退火温度是在上述退火温度基础上减少6℃、72℃延伸1min30s，最后72℃延伸5min；4-10℃保存。
3.根据权利要求2所述的一种马铃薯低温糖化抗性的检测方法，其特征在于，酶切反应体系：PCR产物10μl，10×NEB buffer1.5μl，SapⅠ酶0.3μl，ddH2O 3.2μl；37℃培养箱消化，酶切产物用1%的琼脂糖凝胶检测出的抗低温糖化马铃薯基因型表现为只有1条带，大小为737 bp。
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