[发明专利]用于抑制EB病毒相关肿瘤的化合物及其制备方法和用途

说明书

本发明涉及一种用于抑制EB病毒相关肿瘤的化合物及其制备方法和用途，具体公开了一种用于抑制EB病毒相关肿瘤和其他疾病的化合物及其药学上可接受的盐，其具有式I所示的结构。还公开了式I所示化合物或者其药学上可接受盐在制备抑制EB病毒、EB病毒介导的肿瘤以及EB病毒介导的其他疾病的药物中的用途。本发明的化合物能够高效特异性结合在病毒DNA的复制起点上，特异性强，能够干扰EBNA1与复制起点的结合，影响EBNA1的功能，抑制病毒基因的表达。同时引入Ht‑1，能够增强聚酰胺分子穿透生物膜的能力和结合目标DNA的能力，从而抑制病毒复制，导致宿主细胞死亡。

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及用于抑制EB病毒相关肿瘤的化合物及其制 备方法和用途。

背景技术

EB病毒是一种人类疱疹病毒，除了导致传染性单核细胞增多症以外，它还 是一种主要的致肿瘤病毒。上世纪60年代时便发现它与非洲地方性Burkitt淋巴 瘤有关，后来又陆续发现EB病毒与鼻咽癌、霍金奇病、胃腺癌等有关。EB病 毒先感染人口腔上皮细胞，之后再感染B淋巴细胞。部分带病毒的B淋巴细胞 会逃脱免疫反应，其中的EB病毒进入潜伏感染期。潜伏感染型的EB病毒会表 达一系列病毒蛋白，隐藏表面抗原，使寄生的细胞发生改变，导致不朽化，最终 引发癌症。

在各型EB病毒潜伏型感染中，均表达EB病毒核抗原1型(Epstein-Barr VirusNuclear Antigen 1,EBNA1)。前人研究表明，EBNA1对维持病毒和肿瘤细胞的生 存具有必要性。EBNA1通过与病毒DNA的复制起点结合，促进病毒的复制和 病毒其他基因的表达。阻碍EBNA1与病毒复制起点的结合，如利用小分子竞争 性结合EBNA1或复制起点的结合位点、利用基因编辑修饰病毒DNA或利用 RNA干扰EBNA1的合成等，均对病毒的复制和肿瘤细胞的增殖有抑制作用。

在众多DNA小沟结合剂中，吡咯-咪唑聚酰胺多肽具有很强的DNA序列识 别特异性。它由吡咯、咪唑的衍生物和类似物组成，能嵌合在DNA小沟上，高 效特异性识别和结合在目标DNA序列，在DNA水平上干扰相关基因的表达。

日本名古屋大学的Yasuda小组采用不同的合成方法，合成了针对病毒DNA 复制起点的聚酰胺分子，用于抑制EB病毒(Cancer Science.2011,102.12: 2221-2230)。该分子能识别病毒复制起点上的5个碱基对，针对含EB病毒的小 鼠B95-8细胞的半抑制浓度达到50μmol/L。该方法合成的聚酰胺分子识别的碱 基对较少，特异性较差；体外细胞实验的半抑制浓度大，不足以推进到实际应用。

(1)已经上市的药物中尚未有针对EB病毒导致肿瘤的特效药，主要为传统 化疗药物，如烷化剂、核苷酸类似物等。这些药物不具有靶向性，副作用较大。

(2)siRNA和反义寡核苷酸因为入胞困难而难以施行。(3)小分子药物脱靶效 应明显，相应地特异性也较差。(4)已有的尝试使用聚酰胺类多肽的技术则存 在着合成方法落后、识别碱基少、特异性低的问题。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种高效特异性抑制EB病毒相关肿瘤及 其他疾病的化合物，其能够解决小分子药物入胞困难和脱靶的问题。并且由于针 对已有的聚酰胺分子的特点，合成新的分子以配对更多碱基对，增强了聚酰胺分 子的特异性。

本发明一个方面提供了一种用于抑制EB病毒相关肿瘤和其他疾病的化合物 及其药学上可接受的盐，其具有式I所示的结构，

本发明另一个方面提供了式I化合物的制备方法，其包括如下步骤：

1)在固相树脂上依次偶联1个4-氨基-1-甲基-2-羧基-吡咯、1个4-氨基-1-甲 基-2-羧基-咪唑和2个4-氨基-1-甲基-2-羧基-吡咯；

2)在步骤1)所得中间体末端的吡咯基的氨基上偶联2，4-二氨基丁酸的羧 基；