[发明专利]一种硒化低聚氨基多糖对溃疡性结肠炎小鼠影响模型的建立方法

说明书

本发明公开了一种硒化低聚氨基多糖对溃疡性结肠炎小鼠影响模型的建立方法，通过活体小鼠模型检测硒化低聚氨基多糖（LSA）调解DSS诱导的溃疡性结肠炎的影响。研究结果显示LSA组相对DSS模型组小鼠血液DAO、溶菌酶、D‑LAC含量降低，紧密连接蛋白和黏蛋白含量增高，HE染色和电镜扫描显示结构明显更加完整，提示小鼠肠黏膜通透性降低；LSA可通过抑制NF‑κB p65相关信号通路的磷酸化水平显著缓解DSS导致的炎症因子表达异常，及结肠炎相关氧化指标MDA和氧化酶iNOS浓度的升高。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其是涉及一种硒化低聚氨基多糖对溃疡性结肠炎小鼠影响模型的建立方法。

背景技术

炎症性肠病(IBD)是近年来在我国有较高发病率的一种慢性非特异性肠炎，对于IBD的发病原理尚未清楚，目前达成一致的认知是外在的环境因素对先天的遗传易感染患者产生作用。IBD包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)和克罗恩病(Crohndisease，CD)。UC能够发生于任何年龄段的人，近年来在我国发病率呈逐渐提高，并有年轻化趋势。UC的病患主要是结、直肠癌等高危人群。在癌细胞生成的过程中，炎症因素起着较大的影响，例如癌细胞的出现和生长，以及侵袭与转移。与UC相关的结直肠癌虽然只占所有结肠癌的1％-2％，但其死亡率较高，且确诊后癌变风险还会逐年增长。UC的发病和肠道屏障的损坏、氧化应激、炎症因子的分泌密切相关。虽然近几年医学治疗水平有所提高，但仍无法彻底对IBD这一疾病治愈。

壳聚糖作为一种阳离子多糖同时有极佳生物相容性，以及生物降解性，且无毒副作用，其弱酸性水溶液有高粘性，其表面的氨基基团带正电荷(亦称氨基多糖)，可与细胞表面带负电荷的磷脂等生物大分子作用，使药物易于结合到细胞膜表面促进其吸收，因此已经广泛被应用于药物载体和医用辅助材料领域。硒对人体的必要性已是研究人员的共识，它是人体必需的微量元素之一，硒在体内主要参与抗氧化、甲状腺激素合成和免疫功能等代谢通路，硒在体内的缺乏会引起癌症等数种慢性疾病。随着人们对氨基多糖金属复合物的认识的进一步深入，结合有机硒化合物良好的生物学活性，人们对氨基多糖硒的研究也越来越多。低聚化促进了氨基多糖的水溶性，有利于促进吸收，进而极大发挥其生物活性。硒化低聚氨基多糖(LSA)具有良好的细胞修复、抗氧化和免疫调节功能，能调节肠腔氧化还原状态，可能具备防治溃疡性结肠炎的能力。

发明内容

本发明是为了克服现有技术中的不足，得到了一种硒化低聚氨基多糖对溃疡性结肠炎小鼠影响模型的建立方法。研究结果显示LSA组相对DSS模型组小鼠血液DAO、溶菌酶、D-LAC含量降低，紧密连接蛋白和黏蛋白含量增高，HE染色和电镜扫描显示结构明显更加完整，提示小鼠肠黏膜通透性降低；LSA可通过抑制NF-κ B p65相关信号通路的磷酸化水平显著缓解DSS导致的炎症因子表达异常，及结肠炎相关氧化指标MDA和氧化酶iNOS浓度的升高。UC的发病和肠道屏障的损坏、氧化应激、炎症因子的分泌密切相关，虽然近几年医学治疗水平有所提高，但仍无法彻底对IBD这一疾病治愈，因此我们急需一个安全有效的治疗和预防IBD的药物，硒化低聚氨基多糖作为一个潜在的抗生素替代品可能是理想的选择。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种硒化低聚氨基多糖对溃疡性结肠炎小鼠影响模型的建立方法，

(a)取40只小鼠，适应性饲养三天后，按每组十只分成四组：

正常组：使用蒸馏水饲养，并以水溶液灌胃，每日一次共10天；

LSA组：使用蒸馏水饲养，并以硒化低聚氨基多糖(LSA)水溶液灌胃，每日一次共10天；LSA+DSS组：前三天使用蒸馏水饲养，后七天使用葡聚糖硫酸钠(DSS)水溶液饲养，并每天以硒化低聚氨基多糖(LSA)水溶液灌胃，每日一次共10天；

DSS组：前三天使用蒸馏水饲养，后七天使用葡聚糖硫酸钠(DSS)水溶液饲养，并每天以水溶液灌胃，每日一次共10天；