[发明专利]一种检测miRNA-122的电化学生物传感器

权利要求书

1.一种检测miRNA-122的电化学生物传感器，其特征在于，包括发卡探针1 (HAP1)、ExoIII酶、金电极和修饰于金电极表面的发卡探针2 (HAP2)- 辅助探针；

所述HAP1的序列如SEQ No. 1所示；

所述HAP2的序列如SEQ No. 2所示，其5’端修饰二茂铁，3’端修饰巯基；

所述发卡探针2通过Au-S键修饰于金电极表面；

辅助探针的序列如SEQ No. 3所示，其5’端修饰亚甲基蓝；所述辅助探针通过与发卡探针2杂交修饰于金电极表面。

2.一种利用如权利要求1所述的电化学生物传感器检测miRNA-122的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）金电极抛光处理；

（2）将HAP2溶液滴加于金电极表面，37 ℃恒温孵育；然后再滴加辅助探针溶液，37 ℃恒温孵育；

（3）将HAP1、ExoIII酶与miRNA-122的标准溶液或待测液混合，37 ℃恒温孵育；

（4）将步骤（3）的反应液滴加到步骤（2）所得的电极上，37 ℃恒温孵育；然后漂洗；

（5）以Ag/AgCl为参比电极，以Pt电极为对电极，以步骤（4）所得金电极为工作电极，采用差分脉冲伏安法检测读取电信号的变化；

（6）根据标准溶液的电流变化作标准曲线，计算回归方程，由待测液的电流变化，计算待测液中miRNA-122的浓度。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述抛光处理为将金电极依次在0.3 µm和0.05 µm的氧化铝浆中进行抛光至镜面。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（2）的HAP2和辅助探针的摩尔比为1:1。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（5）中，电位设置为0到-0.5 V，脉冲宽度0.05 V，扫描速率0.06 s。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述HAP1的浓度为0.1-2 µM；所述HAP2的浓度为1-20 µM；所述ExoIII酶的浓度为5-30 U/µL。