[发明专利]一种跨越血眼屏障磁性纳米颗粒的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种跨越血眼屏障磁性纳米颗粒的制备方法及其应用，包括以下步骤：取纯化的细菌磁小体BMs，利用N‑琥珀酰亚胺3‑(2‑吡啶二硫代)丙酸酯为交联剂，将细菌磁小体BMs的氨基端与TAT多肽中半胱氨酸的巯基结合，获得可跨血眼屏障的磁性纳米颗粒，该磁性纳米颗粒为TAT‑BMs复合载体。该磁性纳米颗粒能够跨越血眼屏障，扩展了磁性纳米材料在眼部疾病治疗中应用潜力。

技术领域

本发明涉及一种磁性纳米颗粒，具体是指一种跨越血眼屏障磁性纳米颗粒的制备方法及其应用。

背景技术

细菌磁小体（BMs）是生物合成的磁性纳米颗粒，具有独特的纳米结构、表面覆盖了与细胞膜结构相近的生物膜、大小形态稳定。BMs在生物医药领域具有广泛的应用潜力，例如核磁共振成像、载药以及磁热疗等。与化学合成的磁性纳米颗粒不同，BMs是由趋磁细菌在细胞内合成的，主要成分为Fe₃O₄或Fe₃S₄，大小为30—120 nm。

眼睛是人体非常脆弱的器官，整个器官在血眼屏障的保护下形成一个几乎密闭的空间。然而血眼屏障也阻碍了大部分的药物进入眼部。目前，尚未有BMs跨越血眼屏障的相关报道和应用，从而限制了基于BMs构建的纳米材料在眼部疾病治疗中的应用，因此有必要对此进行研究和改进。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种跨越血眼屏障磁性纳米颗粒的制备方法。

本发明的第二个目的是提供一种跨越血眼屏障磁性纳米颗粒。

本发明的第三个目的是提供一种跨越血眼屏障磁性纳米颗粒在一种眼部用药载体的应用。

为实现本发明的第一个目的，本发明的技术方案是包括以下步骤：

取纯化的细菌磁小体BMs，利用N-琥珀酰亚胺3-(2-吡啶二硫代)丙酸酯为交联剂，将细菌磁小体BMs的氨基端与TAT多肽中半胱氨酸的巯基结合，获得可跨血眼屏障的磁性纳米颗粒，该磁性纳米颗粒为TAT-BMs复合载体。

进一步设置是细菌磁小体BMs与N-琥珀酰亚胺3-(2-吡啶二硫代)丙酸酯在室温条件下混匀对细菌磁小体BMs进行活化，活化处理的细菌磁小体BMs与N-琥珀酰亚胺3-(2-吡啶二硫代)丙酸酯混合体系与TAT多肽在0-4 ℃下混匀过夜，混合物通过反复磁性吸附清洗，获得纯化的TAT-BMs复合载体。

进一步设置是纯化的细菌磁小体BMs通过以下方式获得：

从格瑞菲斯瓦尔德磁螺菌MSR-1中分离纯化细菌磁小体BMs，具体方法如下：收集对数生长期的MSR-1菌株，将菌株重悬于PBS缓冲液中，通过超声破碎和磁性回收的方法收集粗提的细菌磁小体BMs，将粗提的细菌磁小体BMs通过超声清洗和磁性回收的方法继续提纯，直到上清无法检测到蛋白质和DNA残留后，获得了纯化的细菌磁小体BMs。

进一步设置是TAT多肽和纯化的细菌磁小体BMs的质量比：1:2-1:10。

进一步设置是TAT多肽和纯化的细菌磁小体BMs的最佳质量比为1:5。

本发明的第二个发明是提供了一种如所述的制备方法所制备的可跨血眼屏障的磁性纳米颗粒，该磁性纳米颗粒为TAT-BMs复合载体。

本发明的第三个目的是提供了一种如所述的跨越血眼屏障磁性纳米颗粒在制备跨越血眼屏障的眼部药物的应用，该跨越血眼屏障磁性纳米颗粒作为跨越血眼屏障的眼部药物的载体，从而帮助眼部药物跨越血眼屏障。

本发明的有益效果是，提供一种具有跨越血眼屏障功能的磁性纳米颗粒，并提供了相应的制备方法，扩展了磁性纳米材料在眼部疾病治疗中应用潜力，同时还提供该磁性纳米颗粒作为眼部药物在眼部治疗时跨越血眼屏障的载体的应用。具体效果见试验例。

附图说明