[发明专利]一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法在审
| 申请号： | 201711325982.1 | 申请日： | 2017-12-13 |
| 公开（公告）号： | CN108004276A | 公开（公告）日： | 2018-05-08 |
| 发明（设计）人： | 彭继先;于海勤;刘艳平;李辉;吴桂平;乔久生 | 申请（专利权）人： | 山东睿鹰先锋制药有限公司 |
| 主分类号： | C12P7/58 | 分类号： | C12P7/58 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 274039 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 还原 催化 系统 构建 循环 运行 方法 | ||
1.一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）将酮基还原酶和葡萄糖脱氢酶进行共固定化处理，得到固定化多酶；
（2）以固定化酶反应器¸产品提取装置¸300--600Da纳滤装置组成酮基还原循环催化系统；
（3）将固定化酶投入酶反应器中，加入辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ，加入酮基底物和葡萄糖进行催化反应；
（4）反应结束后滤出固定化酶，滤液提取产品；
（5）产品提取母液中加入氯化钙溶液，过滤，分别收集葡萄糖酸钙和滤液；
（6）滤液用300--600Da纳滤装置脱除无机盐及部分残留的葡萄糖酸，得辅酶浓缩液；
（7）步骤（6）中的辅酶浓缩液用去离子水调整体积，加入步骤（4）中回收的固定化酶，加入酮基底物及葡萄糖，即可开始下一批反应；
（8）依此重复步骤（7）¸步骤（4）¸步骤（5）¸步骤（6），实现酮基还原催化系统的连续循环运行。
2.根据权利要求1所述一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法，其特征在于：所述固定化酶反应器为带过滤和搅拌的批次反应罐。
3.根据权利要求1所述一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法，其特征在于：所述提取装置包括：微孔疏水膜萃取器 蒸馏釜 吸附交换柱 板框过滤器 结晶罐 。
4.根据权利要求1所述一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法，其特征在于：酮基还原酶的来源包括：野生或经过诱变的细菌¸酵母菌以及经过基因工程改造的菌株。
5.根据权利要求1所述一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法，其特征在于：葡萄糖脱氢酶来源于野生或经过诱变的巨大芽孢杆菌以及经过基因工程改造的菌株。
6.根据权利要求1所述一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法，其特征在于：目标产品包括：手性醇¸手性酯¸手性氨基酸。
7.根据权利要求1所述一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法，其特征在于：步骤（1）中的酮基还原酶活力：葡萄糖脱氢酶活力按照1:0.5-2的比例共固定化于环氧基载体或氨基载体上。
8.根据权利要求1所述一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法，其特征在于：产品底物为酮基化合物，辅酶再生底物为葡萄糖。
9.根据权利要求1所述一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法，其特征在于：加入氯化钙溶液去除反应液中的副产物葡萄糖酸。
10.根据权利要求1所述一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法，其特征在于：利用300-600Da纳滤装置浓缩辅酶I或辅酶Ⅱ。
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