[发明专利]一种纳米氧化铜-聚乙烯醇基海绵材料固定化细菌的制备方法及应用

权利要求书

1.一种纳米氧化铜-聚乙烯醇基海绵材料固定化细菌的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，PVA基海绵的预处理：

先用质量浓度5％-8％的盐酸浸泡搅拌20min-30min，纯水冲洗两遍，再用质量浓度5％-8％的氢氧化钠浸泡搅拌20min-30min，纯水冲洗至pH＝6-8，纯水浸泡超声1h-2h，50℃-60℃烘干；

步骤2，CuO NPs负载PVA载体的制备：

将预处理过的PVA基海绵0.2g-0.3g，加入到80mL-150mL浓度为50mg/L-150mg/L的纳米氧化铜溶液中，在超声波反应器中充分混合30min-40min，然后将负载了CuO NPs的PVA基海绵分离出来，50℃-60℃下真空干燥10-15小时，即得纳米氧化铜-聚乙烯醇基海绵材料；

步骤3，细菌的同步驯化和固定化：

选取培养基富集菌株，用无机盐清洗后制备成菌悬液；称取纳米氧化铜-聚乙烯醇基海绵材料置于锥形瓶中，灭菌后冷却至室温，向锥形瓶内加入所述菌悬液，加入所述菌株能够降解的毒害物质，水浴摇床培养，所加毒害物质降解完全，即完成细菌的同步驯化和固定化过程，所述菌株为Sphingobacterium sp.LX-3，所述培养基为LB培养基，所加毒害物质为喹啉，并作为唯一的碳源和氮源，完成细菌的驯化和固定化过程后，将固定化了菌株的改性海绵材料取出，用无机盐培养基(MSM)缓慢清洗两遍去除表面的自由菌。

2.根据权利要求1所述纳米氧化铜-聚乙烯醇基海绵材料固定化细菌的制备方法，其特征在于，所述菌悬液规格为OD₆₀₀＝1.0±0.1，纳米氧化铜-聚乙烯醇基海绵材料与菌悬液的质量体积比为(2-3)g：(150-200)mL，喹啉的加入量为(300-500)mg/L。

3.根据权利要求1所述纳米氧化铜-聚乙烯醇基海绵材料固定化细菌的制备方法，其特征在于，所述水浴摇床培养条件为37℃，180r/min；所述灭菌条件为121℃，25分钟。

4.权利要求1所述的纳米氧化铜-聚乙烯醇基海绵材料固定化细菌用于降解毒害物质的用途。