[发明专利]一种同步化培养微藻的方法有效

专利信息
申请号: 201711334097.X 申请日: 2017-12-14
公开(公告)号: CN109957510B 公开(公告)日: 2023-07-28
发明(设计)人: 杨欢;张京奎;刘士涛;邹志刚;吴聪萍;刘建国 申请(专利权)人: 南京大学昆山创新研究院
主分类号: C12N1/12 分类号: C12N1/12;C12R1/89
代理公司: 广州华智创益知识产权代理有限公司 44568 代理人: 陈佳良
地址: 215300 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 同步 培养 方法
【权利要求书】:

1.一种同步化培养小球藻的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)将小球藻以10%接种量接种于含有葡萄糖的培养基中,培养温度为30℃,初始转速200rpm,100μmol/m2/s的光照条件下培养2天;

(2)将步骤(1)获得的小球藻的培养温度迅速降至4℃的诱导温度进行低温诱导培养1个月,在步骤(2)开始之前,在培养基中补加保护剂,以避免低温处理对细胞的损伤;

(3)将步骤(2)获得的小球藻的培养温度重新升至30℃,继续培养3天,以获得基本处于同步化生长的细胞;

(4)将步骤(3)获得的细胞利用分批培养方式培养,按10%的接种量接种于生物反应器中,装液系数0.70,培养温度30℃,气液比1.0 vvm,初始转速200rpm;

(5)当步骤(4)获得的细胞密度达到100g/L时,流加补料培养基;

(6)流加培养10-48小时后停止补料,使细胞饥饿2-8小时,调控细胞代谢处于饥饿状态,溶氧迅速上升,将溶氧开始上升时记为饥饿开始时间,恢复补料后,溶氧迅速下降,将溶氧开始下降时记为饥饿结束时间,调控细胞代谢恢复至营养代谢状态;

(7)重复步骤(6)若干次,直至细胞密度达到预期值,所述预期值为100g/L;

(8)当步骤(7)中的细胞密度达到预期值时,更换补料培养基,使培养基中糖处于匮乏状态,促使细胞内蛋白质大幅积累,培养96小时,细胞干达到108g/L,蛋白质含量达到55%。

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