[发明专利]苗期鉴别辣椒雄性不育两用系中单株育性的分子标记方法

权利要求书

1.一种苗期鉴别辣椒雄性不育两用系中单株育性的分子标记方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）辣椒基因组DNA的提取；

2）以人工设计合成的一对核苷酸分子为引物，对上述辣椒基因组DNA进行PCR扩增；

正向引物：5’- GGTTATGATGTTGGTGCTGGT-3’；

反向引物：5’-GACAATCCCATAACAGCAACC-3’；

3）PCR扩增产物经0.8 %琼脂糖凝胶上电泳、溴化乙锭染色，用凝胶成像系统观察并拍照记录。在辣椒雄性不育两用系中，雄蕊可育植株会出现一条557bp的特异条带，而雄性不育植株不会出现这一特异条带。

2.根据权利要求1所述的苗期鉴别辣椒雄性不育两用系中单株育性的分子标记方法，其特征在于，所述的PCR扩增反应条件是：

1）20 μL PCR反应体系：10倍PCR buffer 2.0 μL、25 mmol•L^-1 MgCl₂ 1.2 μL、5 U•μL^-1Taq DNA聚合酶0.16 μL、5 mmol•L^-1dNTPs 0.4 μL、20 μmol•L^-1正向引物0.6 μL、20 μmol•L^-1反向引物0.6μL、40 ng•μL^-1基因组DNA 2.0 μL以及ddH₂O 13.04 μL；

2）PCR扩增反应在PCR仪上进行，反应条件是：94 ℃预变性5 min；94 ℃变性30 s，58℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，进行32个循环；最后72 ℃延伸10 min；于4 ℃保存备用。