[发明专利]一种针对禽偏肺病毒分型鉴定的荧光定量检测试剂盒在审
| 申请号： | 201711339960.0 | 申请日： | 2017-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN108130383A | 公开（公告）日： | 2018-06-08 |
| 发明（设计）人： | 李守军;阎旭;李亚杰;付旭彬;郁宏伟;刘海霞;王艳晓 | 申请（专利权）人： | 天津瑞普生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 天津合志慧知识产权代理事务所(普通合伙) 12219 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 300308 天津市滨海*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 分型鉴定 偏肺病毒 荧光定量检测 试剂盒 灵敏度试验 设计和筛选 特异性试验 鉴别检测 临床检测 相对定量 荧光引物 血清型 核酸 内参 灵敏 应用 优化 兼容 验证 检测 试验 | ||
1.一种针对禽偏肺病毒分型鉴定的荧光定量检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括五条探针，分别为：序列如SEQ ID NO.3所示的、用于检测禽偏肺病毒A亚型G蛋白表达基因的特异性探针；序列如SEQ ID NO.6所示的、用于检测禽偏肺病毒B亚型G蛋白表达基因的特异性探针；序列如SEQ ID NO.9所示的、用于检测禽偏肺病毒C亚型G蛋白表达基因的特异性探针；序列如SEQ ID NO.12所示的、用于检测禽偏肺病毒D亚型G蛋白表达基因的特异性探针。
2.根据权利要求1所述的一种针对禽偏肺病毒分型鉴定的荧光定量检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括序列如SEQ ID NO.15所示的、用于检测鸡ACTB基因的特异性探针；其中所述鸡ACTB基因是所述试剂盒中的内参基因。
3.根据权利要求2所述的一种针对禽偏肺病毒分型鉴定的荧光定量检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括序列如SEQ ID NO.1所示的、针对禽偏肺病毒A亚型G蛋白表达基因的特异性上游引物，还包括序列如SEQ ID NO.2所示的、针对禽偏肺病毒A亚型G蛋白表达基因的特异性下游引物。
4.根据权利要求3所述的一种针对禽偏肺病毒分型鉴定的荧光定量检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括序列如SEQ ID NO.4所示的、针对禽偏肺病毒B亚型G蛋白表达基因的特异性上游引物；还包括序列如SEQ ID NO.5所示的、针对禽偏肺病毒B亚型G蛋白表达基因的特异性下游引物。
5.根据权利要求4所述的一种针对禽偏肺病毒分型鉴定的荧光定量检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括序列如SEQ ID NO.7所示的、针对禽偏肺病毒C亚型G蛋白表达基因的特异性上游引物，还包括序列如SEQ ID NO.8所示的、针对禽偏肺病毒C亚型G蛋白表达基因的特异性下游引物。
6.根据权利要求5所述的一种针对禽偏肺病毒分型鉴定的荧光定量检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括序列如SEQ ID NO.10所示的、针对禽偏肺病毒D亚型G蛋白表达基因的特异性上游引物，还包括序列如SEQ ID NO.11所示的、针对禽偏肺病毒D亚型G蛋白表达基因的特异性下游引物。
7.根据权利要求6所述的一种针对禽偏肺病毒分型鉴定的荧光定量检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括序列SEQ ID NO.13所示的针对鸡看家基因的特异性上游引物；还包括序列SEQ ID NO.14所示的针对鸡看家基因的特异性下游引物。
8.根据权利要求7所述的一种针对禽偏肺病毒分型鉴定的荧光定量检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括针对鸡ACTB基因的第一反应体系，所述第一反应体系包括以下成分：10×PCR Buffer 5μL，0.07μM的dNTP Mixture 1.4μL，2U/μL的SSIII反转录酶0.5μL，0.05U/μL的Taq HS DNA聚合酶0.5μL，浓度为0.4μM、序列如SEQ ID NO.13所示的上游引物2μL，浓度为0.6μM、序列如SEQ ID NO.14所示的下游引物3μL，浓度为0.08μM、序列如SEQ IDNO.15所示的探针0.8μL，RNA溶液10μL，DEPC水26.8μL。
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