[发明专利]一种森林山蛭抗血栓多肽Sylvestin及其体外表达制备方法和应用有效
| 申请号： | 201711340940.5 | 申请日： | 2017-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN108101975B | 公开（公告）日： | 2020-05-15 |
| 发明（设计）人： | 赖仞;方鸣谦;韩亚君 | 申请（专利权）人： | 中国科学院昆明动物研究所 |
| 主分类号： | C07K14/435 | 分类号： | C07K14/435;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/17;A61P7/02;A61P9/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 刘奇 |
| 地址： | 650500 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 森林 山蛭抗 血栓 多肽 sylvestin 及其 体外 表达 制备 方法 应用 | ||
1.一种森林山蛭抗血栓重组多肽Sylvestin，其特征在于，所述重组多肽Sylvestin包括多肽Sylvestin和肠激酶酶切位点片段，所述重组多肽Sylvestin的序列如Seq ID No.3所示。
2.编码权利要求1所述的重组多肽Sylvestin的核苷酸，所述核苷酸序列如Seq IDNo.4所示。
3.一种重组多肽Sylvestin的重组表达载体，其特征在于，所述表达载体包括如Seq IDNo.4所示的核苷酸序列。
4.一种重组多肽Sylvestin的重组表达菌株，其特征在于，所述重组表达菌株包括权利要求3所述的重组表达载体。
5.一种森林山蛭抗血栓多肽Sylvestin定点突变获得的改造肽，其特征在于，所述改造肽的氨基酸序列如Seq ID No.5、Seq ID No.6、Seq ID No.7或Seq ID No.8所示。
6.权利要求1所述的多肽Sylvestin的体外表达制备方法，包括以下步骤：
1）构建权利要求4所述的重组表达菌株；
2）诱导所述重组菌株表达，获得含重组多肽Sylvestin的菌液；所述诱导的温度为16~30℃，所述诱导的IPTG浓度为0.05~0.55mmol/L，所述诱导的时间为1~18h；
3）从所述菌液中分离纯化获得Seq ID No.3所示氨基酸序列的重组多肽Sylvestin；
4）用肠激酶酶切所述重组多肽Sylvestin，获得多肽Sylvestin；
所述多肽Sylvestin的氨基酸序列如Seq ID No.1所示。
7.权利要求5所述的改造肽在制备抗血栓药物中的应用。
8.权利要求5所述的改造肽在制备治疗中风药物中的应用。
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