[发明专利]抗线虫棉花转化事件GHM3

说明书

本申请提供了抗线虫棉花转化事件GHM3，并提供了相关的创制方法、检测方法和应用，属于植物生物技术领域。具体地，本申请以棉花品种材料YZ‑1为受体经过转基因，得到在特定基因组序列之间插入外源基因插入物的棉花植株，其中外源基因插入物包含抗线虫基因。本申请所获得转化事件GHM3，所插入的外源基因位于棉花基因组的非功能位点，不影响植物自身其他基因的表达，在使转基因棉花植物获得抗虫特性的同时，保持了其良好的农艺性状。

技术领域

本申请涉及植物生物技术领域，具体涉及一种抗线虫棉花转化事件的创制方法、检测方法和应用。

背景技术

棉花作为一种特殊的经济作物，在种植过程中很容易受到外界因素的影响。除了温度、湿度、施肥等因素的影响外，棉花种植过程中容易受到病虫害的影响，如果不及时采取必要的病虫害预防措施，将会影响棉花的整体产量，同时给棉花种植带来不利影响。

棉花病害分为侵染性病害和非侵染性病害两大类。其中侵染性病害是由病原生物，例如真菌、细菌、线虫、病毒等引起的。虽然可以采用喷洒农药杀虫剂的方法来预防棉花虫害，但杀虫剂残留对于棉花产品的安全性存在一定的隐患，因而开发抗病虫的棉花品种是从根部上防治虫害爆发的根本。

转基因技术可以应用于棉花品种的开发，使棉花具备抗虫害体质，是目前流行的防治虫害的强有力手段。用于棉花的抗虫基因主要是针对鳞翅目害虫和同翅目昆虫，如苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，Bt)的内毒素蛋白基因、豇豆胰蛋白酶抑制基因(Cowpea Trypsin Inhibitor，CpTI)和植物凝集素基因(1ectin)。对于土壤中危害棉花的线虫，尚有待于开发有效的转基因抗性品种。

发明内容

一方面，本申请提供了核酸分子，其为：i)包含SEQ ID NO:1的第374-1036位核苷酸和/或第3657-4356位核苷酸所示序列，或其片段或其变体或其互补序列；ii)包含SEQ IDNO:1的第374-1036位核苷酸和第3335-3722位核苷酸所示序列，或其片段或其变体或其互补序列；iii)包含SEQ ID NO:1的第3335-3722位核苷酸和第3657-4356位核苷酸所示序列，或其片段或其变体或其互补序列；或者iv)包含SEQ ID NO:1的第374-1036位核苷酸，第3335-3722位核苷酸和第3657-4356位核苷酸所示序列，或其片段或其变体或其互补序列。

在一实施方案中，本申请提供的核酸分子包含SEQ ID NO:1所示序列，或其片段或其变体或其互补序列。

在另一实施方案中，本申请提供的核酸分子包含表达抗线虫基因的表达盒，如SEQID NO:1的第2482-3991位核苷酸所示序列。

在又一实施方案中，本申请提供的核酸分子，其通过将如SEQ ID NO:1的第2482-3991位核苷酸所示的表达抗线虫基因的表达盒导入棉花的基因组中获得。

在另一实施方案中，本申请提供的核酸分子存在于棉花植物、种子、植物细胞、后代植物或植物部分中。

另一方面，本申请提供了用于检测棉花转化事件的探针，其包含SEQ ID NO:1的第374-1036位核苷酸或第3657-4356位核苷酸所示序列，或其片段或其变体或其互补序列。

又一方面，本申请提供了用于检测棉花转化事件的引物对，其能够特异性扩增产生包含SEQ ID NO:1的第374-1036位核苷酸或第3657-4356位核苷酸所示序列，或其片段或其变体或其互补序列。