[发明专利]具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料及其制备方法

权利要求书

1.具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料，其特征在于：制备方法包括：将壳聚糖溶于乙酸溶液中，搅拌至完全溶解后静置0.5-2小时得到溶液A，然后将溶液A加入三聚磷酸钠溶液中并剧烈搅拌，混合完成后继续剧烈搅拌0.5-2小时，得到象牙白悬浊液静置8-36小时后，离心分离，并用超纯水洗涤至少5次，制得壳聚糖凝胶；

以1，4，7，10-四氮十二杂环-1，4，7，10-四羧酸四盐酸盐即DOTA为原料，在EDC 即1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和NHS 即N-羟基琥珀酰亚胺的催化作用下与醋酸锰及所述的壳聚糖凝胶发生酰胺化反应合成以DOTA的锰配合物修饰的壳聚糖凝胶，即为所述的具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料。

2.一种如权利要求1所述的具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料的制备方法，其特征在于，步骤如下：

步骤一、壳聚糖凝胶的制备：将壳聚糖溶于乙酸溶液中，搅拌至完全溶解后静置0.5-2小时得到溶液A，然后将溶液A加入三聚磷酸钠溶液中并剧烈搅拌，混合完成后继续剧烈搅拌0.5-2小时，得到象牙白悬浊液静置8-36小时后，离心分离，并用超纯水洗涤至少5次，制得壳聚糖凝胶，置于水中备用；

步骤二、1，4，7，10-四氮十二杂环-1，4，7，10-四羧酸四盐酸盐的合成：以1,4,7,10-四氮杂环十二烷为原料与氯乙酸发生反应得到1，4，7，10-四氮十二杂环-1，4，7，10-四羧酸四盐酸盐即DOTA；

步骤三、具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料的制备：将步骤二所得的1，4，7，10-四氮十二杂环-1，4，7，10-四羧酸四盐酸盐和pH为5.4的MES缓冲溶液按照0.2 -1.0 g：20-80 mL混合，然后依次投入EDC以及NHS和二水合醋酸锰的混合物，在室温下反应3-8小时，得到混合液B，然后将湿润壳聚糖凝胶分散液与混合液B混合并在室温下继续反应12-36小时，反应得到乳白色状物体离心分离并用乙醇与超纯水洗涤至少三次，每次洗涤间隔至少两小时并保证材料浸泡在乙醇或水中，将洗涤后所得物干燥，所得灰白色固体仔细研磨后即为所述的具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料。

3.如权利要求2所述的具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料的制备方法，其特征在于：所述步骤一中，所述乙酸溶液的浓度为0.5-2.0%m/v的乙酸水溶液，所述壳聚糖与乙酸溶液按照1.5 - 3.0g：300-600 mL的比例混合；所述三聚磷酸钠溶液是0.1-1.0 mg/mL的三聚磷酸钠水溶液；所述三聚磷酸钠溶液与乙酸溶液的体积比为0.5:1.5。

4.如权利要求2所述的具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料的制备方法，其特征在于：所述溶液A加入三聚磷酸钠溶液中的过程是，将溶液A采用蠕动泵以50-180mL/分的速度泵入三聚磷酸钠溶液。

5. 如权利要求2所述的具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料的制备方法，其特征在于：所述步骤一中，离心分离条件为5000 -10000 rpm，15 min。

6. 如权利要求2所述的具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料的制备方法，其特征在于：所述步骤三中，所述湿润壳聚糖凝胶分散液为湿润壳聚糖凝胶超声分散在pH为5.0-6.0的MES缓冲溶液中所得，所述湿润壳聚糖凝胶与MES缓冲溶液的比例为0.1 -1.0g ：10 -80 mL。

7. 如权利要求2所述的具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料的制备方法，其特征在于：步骤三中，所述1，4，7，10-四氮十二杂环-1，4，7，10-四羧酸四盐酸盐、MES缓冲溶液、EDC、NHS、二水合醋酸锰以及湿润壳聚糖凝胶分散液的比例为0.25 -1.0 g：20 - 80 mL：0.005 - 0.04mol： 0.004 -0.016 mol：0.5 - 2 mmol：10 -40 mL。

8. 如权利要求2所述的具有高的SOD酶活性的四氮大环锰配合物修饰壳聚糖复合材料的制备方法，其特征在于：步骤三中，所述离心分离条件为5000 -10000 rpm，10 -20min；所述干燥条件为35-50℃真空干燥24-72小时。