[发明专利]一种突变蜂毒肽MEL-pep及其应用

说明书

本发明公开了一种突变蜂毒肽MEL‑pep及其应用，该多肽的氨基酸序列如SEQ ID：NO.1所示。实验结果表明MEL‑pep具有明显的抑制5‑氟尿嘧啶(5‑FU)耐药的人肝癌细胞BEL‑7402/5‑FU生长的作用，显著下调BEL‑7402/5‑FU细胞表面P‑gp，能够抑制BEL‑7402/5‑FU细胞耐药蛋白P‑gp蛋白以及基因的表达；MEL‑pep能显著抑制BEL‑7402/5‑FU细胞荷瘤鼠肿瘤体内生长，并呈剂量依赖性，而且MEL‑pep体内抗BEL‑7402/5‑FU细胞增殖活性显著。

技术领域

本发明属于生物化学中的多肽药物技术领域，涉及一种突变蜂毒肽MEL-pep及其应用。

背景技术

抗菌肽是一类广泛存在于各种生物体内的天然小分子多肽，是天然免疫系统的组成部分，具有抵抗外源微生物和清除体内病变细胞等作用。除了抗菌作用外，抗菌肽以其独特、迅速的抗肿瘤活性，备受关注。抗菌肽大部分带正电荷，富含疏水碱基，能形成两亲性结构。抗菌肽具有特殊的抗肿瘤机制，且作用迅速；与一般抗肿瘤药物相比，能够选择性作用于肿瘤细胞；对哺乳动物的正常细胞毒性较低，也不易产生耐药性，这些优势使抗菌肽成为抗肿瘤药物研发的热点之一。

蜂毒是工蜂毒腺和副腺分泌出的具有芳香气味的淡黄色透明毒液,具有多种药理学和生物学活性的复杂混合物。蜂毒肽(Melittin，MEL)是蜂毒的主要组成部分，约占蜂毒干重的50％，是一种由26个氨基酸残基组成的线性多肽，相对分子量为2847，等电点约为12.02，全序列为：甘氨酸-异亮氨酸-甘氨酸-丙氨酸-缬氨酸-亮氨酸-赖氨酸-缬氨酸-亮氨酸-苏氨酸-苏氨酸-甘氨酸-亮氨酸-脯氨酸-丙氨酸-亮氨酸-异亮氨酸-丝氨酸-色氨酸-异亮氨酸-赖氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-谷氨酸-谷氨酸。蜂毒肽能够抑制多种类型肿瘤细胞的生长，是一个非常具有应用前景的抗肿瘤天然药物。

发明内容

本发明解决的内容在于提供一种突变蜂毒肽MEL-pep及其应用，以蜂毒肽的氨基酸序列为基础合成新型多肽，其具有抗肝癌效果。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种突变蜂毒肽MEL-pep，该多肽的氨基酸序列如SEQ ID：NO.1所示。

所述的突变蜂毒肽MEL-pep在制备治疗和/或预防肿瘤疾病的药物中的应用。

所述的突变蜂毒肽MEL-pep在制备治疗肝癌的药物中的应用。

所述的突变蜂毒肽MEL-pep在制备治疗对5-FU耐药的肝癌的药物中的应用。

所述的突变蜂毒肽MEL-pep在制备能够作用于5-FU耐药的肝癌细胞膜的药物中的应用。

所述的突变蜂毒肽MEL-pep在制备逆转5-FU耐药的肝癌的药物中的应用。

所述的突变蜂毒肽MEL-pep在制备抑制5-FU耐药的肝癌细胞体内生长抑制的药物中的应用。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

本发明提供的突变蜂毒肽MEL-pep，以α-螺旋轮模型为理论模型，提高多肽的螺旋程度，并增强多肽的正电荷性，将MEL第八位的缬氨酸和第十四位的脯氨酸均改为赖氨酸，得到新型多肽MEL-pep。多肽MEL-pep不仅提高了螺旋程度，并且将其净电荷数由5提升至7，使其具有更强的抗肿瘤活性。实验结果表明MEL-pep具有明显的抑制5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的人肝癌细胞BEL-7402/5-FU生长的作用，可用来制备抗肝癌治疗的药物。