[发明专利]一种治疗鱼鳃烂病饲料的制备方法

权利要求书

1.一种治疗鱼烂鳃病饲料的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：

（1）取富硒平菇干燥，粉碎，过80目筛，收集过筛颗粒物B，取过筛颗粒物A、过筛颗粒物B按质量比2：2：25加入蒸馏水混合，调节pH至5~5.5，加入纤维素酶，酶解，灭酶，取灭酶液按质量比1：15加入蒸馏水，调节pH至9.0~9.2，加入碱性蛋白酶，提取，离心，取上清液，冷冻干燥，得营养粗粉，备用；

（2）取鲜大黄洗净，置于无菌水浸泡1~2min，再置于质量分数为10%的次氯酸钠溶液中浸泡10~15min，取出用无菌水冲洗，将大黄从纵横两个方向切成4块，分别接种至PDA固体培养基中培养，挑取菌径最大的菌落划线接种至PDA固体培养基中，重复2~3次，得到纯化菌落，取纯化菌落按质量比1：5加入无菌水中，振荡摇匀，按5%的接种量接种至发酵培养基中培养，离心，取上清液，冷冻干燥，得干燥物，备用；

（3）取蟾饲五谷虫干燥，按质量比1：10加入蒸馏水，于95~100℃保持1~2h，取出处理后蟾饲五谷虫按质量比1：2加入磷酸盐缓冲液，搅拌混合，静置，离心，取上清液A过0.22μm滤膜过滤，取滤液按质量比1：9加入正己烷萃取，取萃取液按质量比1：9加入乙酸乙酯萃取，离心，取上清液B按质量比5：3加入硫酸铵，静置，离心，收集沉淀，冷冻干燥，得干燥物B按质量比10：2：3加入鼠尾藻粉末和鱼粉混合，得混合物；

（4）取明胶、褐藻酸钠按质量比1：1：25加入水中混合，得混合液，按质量份数计，取20~30份步骤（1）备用的营养粗粉、12~15份步骤（2）备用的干燥物A、4~7份混合物、3~5份混合液混合，研磨搅拌，调节pH至3.5~4.5，取搅拌混合物按质量比1：2加入50~55℃蒸馏水，于4~5℃条件下再加入搅拌混合物质量1~2%的质量分数为4%戊二醛溶液，保持15min，静置，取沉淀，用蒸馏水冲洗，真空干燥，即得治疗鱼烂鳃病饲料。

2.根据权利要求1所述的治疗鱼烂鳃病饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中美藤果粕预处理：取美藤果饼粕于0.35MPa、蒸汽爆破处理120s，取蒸汽爆破物按质量比1：6加入石油醚，于70~80℃回流提取5~6h，过滤，取滤液旋转蒸发，干燥，粉碎过100目筛，收集过筛颗粒物A。

3.根据权利要求1所述的治疗鱼烂鳃病饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中纤维素酶的加入量为过筛颗粒物A质量10~15%；碱性蛋白酶的加入量为灭酶液质量20~30%的碱性蛋白酶。

4.根据权利要求1所述的治疗鱼烂鳃病饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中发酵培养基：按质量份数计，取150~200份马铃薯，2~5份葡萄糖，0.5~0.8份豆油，10~13份玉米粉，15~20份大黄浸汁，1000份水，121℃灭菌20min；其中大黄浸汁是称取新鲜大黄按质量比1：10加入蒸馏水，于95~100℃保持20~25 min，过滤，取滤液，即得。