[发明专利]一种肝再生相关长链非编码RNA及其抑制剂和应用

说明书

本发明公开了一种肝再生相关长链非编码RNA及其抑制剂和应用。本发明通过构建的大鼠2/3肝切除模型，采用大鼠lncRNA array v 2.0芯片筛选出肝再生中的差异表达lncRNA，用关联推定法预测lncRNA的功能，筛选出了肝再生相关的1ncRNA TCONS_00042303，其转录本核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，根据该序列，设计并合成了lncRNA TCONS_00042303的抑制剂；本发明提供的抑制剂能够抑制体外培养的BRL‑3A细胞的lncRNA TCONS_00042303表达，促进肝细胞增殖。本发明为治疗肝移植预后辅助治疗提供了新的药物靶点，具有良好的应用前景和理论价值。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种大鼠肝再生相关lncRNA的筛选方法，本发明还涉及一种肝再生相关长链非编码RNA及其抑制剂，以及在制备调节肝细胞增殖的药物中的应用。

背景技术

肝是机体的重要器官，有储存物质、代谢、生物转化、解毒、造血和合成胆色素等功能。肝受物理因素、化学因素及切除等损伤后，残肝可通过再生能力补偿损伤/丢失的肝组织，恢复肝的结构、重量和体积。肝细胞是肝再生的核心成分，肝再生涉及的细胞活化、增殖及凋亡等生理活动，并与肝功能、生长发育、肝病发生等密切相关，切除肝病变区域是临床治疗肝硬化和肝癌的重要手段，在部分肝切除后，如何有效地激发残余肝的再生潜能是术后病人得以存活的关键。因此，对肝切除或肝损伤诱导的肝再生的分子机制的研究对肝疾病的治疗及药物的开发中都具有十分重要的意义。

长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是指核苷酸数大于200nt的非编码RNA转录本。lncRNA种类丰富，功能复杂，位于不同的亚细胞核区域，在不同物种间序列保守性低，有组织与发育阶段特异性，同时具有快速进化潜力。lncRNA可转录自基因与非基因区域，包括基因的上游区域、基因间区域、基因内部内含子区域等，大多数的lncRNA被确定是转录和翻译过程中的关键调节因子，在染色质重塑、转录及转录后调节、细胞内物质运输、细胞核亚结构形成、干细胞多能性、体细胞重编程、发育调节、疾病发生等活动中发挥中重要作用。已证实多种疾病尤其是癌症如肝癌、乳腺癌、卵巢癌、胃癌等都涉及到lncRNA的异常表达。研究lncRNA对肝细胞增殖和肝再生的调节作用，对揭示肝再生机制、建立预防和治疗肝病方法等都具有重要理论意义和应用价值。

以RNA为靶点的反义寡核苷酸药物研究已得到越来越多的重视。实验证实以病毒基因、肿瘤发生相关基因、细胞因子以及其他疾病相关基因为靶点的反义寡核苷酸药物有明显的生物学效应。因此，从lncRNA角度筛选新的药物靶点可为治疗相关疾病提供了一种新的治疗策略。

发明内容

本发明的目的提供一种长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)TCONS_00042303的应用方法，具体是利用lncRNA TCONS_00042303为靶点调节肝细胞增殖。

一种肝再生相关长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)，所述lncRNA为lncRNA TCONS_00042303，所述lncRNA TCONS_00042303转录本核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了一种用于调节肝细胞增殖的抑制剂，所述抑制剂是用于调节lncRNA TCONS_00042303转录本核苷酸序列表达水平的DNA或RNA。

在根据本发明的一个实施方案中，该抑制剂是基于lncRNA TCONS_00042303转录本核苷酸序列设计的siRNA。

在根据本发明的一个实施方案中，该抑制剂选自以下6种siRNA中的一种或多种：

1)siRNA-1：SEQ ID NO：6atgatgtgggatgtacaag

2)siRNA-2：SEQ ID NO：7tgcttgatgatgtaggtcc