[发明专利]一种草菇菌种保藏的培养基制备方法和培养基及其保藏方法

说明书

本发明涉及一种草菇菌种保藏的培养基制备方法，和该制备方法制备得到的培养基及使用该培养基对草菇菌种进行保藏的方法，属于菌种保藏领域，将稻草经过特定的碱溶液和超声处理后，与普通的琼脂培养基一起，用于草菇菌种的保藏。与现有技术相比，本发明的有益效果在于：本发明以稻草为原料，原料成本低，本发明的培养基的保藏不需要在低温下保藏，进一步降低成本，也不需要投入冰箱等器械或使用液氮、海藻糖等高成本的原料，经证实，保藏时间可以达到30天以上，活力基本没有降低。

技术领域

本发明涉及一种草菇菌种保藏的培养基制备方法，和该制备方法制备得到的培养基及使用该培养基对草菇菌种进行保藏的方法，属于菌种保藏领域。

背景技术

草菇的味道鲜美，肉质脆嫩，是一种深受群众喜爱的农产品。由于其生产周期短，从播种到采收只需要10天左右，一般13-20天完成一个生长周期，是目前经济效益最好的食用菌之一。2016年我国草菇产量213304吨，广东省草菇产量63000吨，占全国产量30％左右，居全国首位。

草菇是一种高温型食用菌，。据史料记载，草菇的栽培和食用最早见于我国南部地区。据福建《宁德县志》载：“城北瓮窑禾朽，雨后生蕈，宛如星斗丛簇竞吐，农人集而投于市。”可见，腐烂的稻草是草菇天然的栽培基质。在上世纪80年代之前，稻草一直是草菇栽培的主要原料。此后，技术人员开发现了废棉、中药渣等新型栽培基质并开发出相应的栽培技术，获得了草菇高产的技术。近年来，来自工业生产的副产物废棉被发现存在安全隐患，而来自农业下脚料的稻草则重新被重视。

优质的草菇菌种是草菇生产的基础，而草菇保藏问题一直未有得到很好的解决。低温、隔绝空气、低营养或增加营养吸收难度等限制菌丝体生长而又不致死亡的条件，是食用菌保藏技术的基本原理。但是，草菇菌种不耐低温，较长时间保藏在10℃以下环境里会失去活力，甚至死亡，草菇菌种不能像其他食用菌使用4-10℃环境进行保藏，其菌丝在此条件下发生自溶。目前，草菇保藏方法主要有：传代培养保藏法、液氮超低温保藏法、使用海藻糖等保藏剂。但是，草菇营养繁殖体菌丝由于生长快速，容易发生变异、老化和退化。长期的继代培养也会造成草菇种质退化，表现为生长速度下降、菌丝密度降低、水解酶产量下降等。而且传代培养保藏法需要间隔一段时间进行传代操作，比较繁琐，污染率也高。而液氮保藏法技术较为复杂，在浸入液氮前需要程序性降温，液氮容器及补充液氮的费用高，降低了草菇的经济价值。而海藻糖等保藏剂也存在价格昂贵，经济价值低的缺陷。

发明内容

针对以上不足，本发明提供一种简单经济的草菇菌种保藏的培养基，该培养基的制备方法以及采用该培养基进行菌种保藏的方法。

本发明通过以下方案达到上述目的：

发明人创造性地发现，将稻草经过特定的碱溶液和超声处理后，与普通的琼脂培养基一起，用于草菇菌种的保藏，不仅可以长期保持其活力，而且不需要在低温下保藏，容易操作，不需要增添其他器械，稻草价格低，成本低，具有经济价值和推广价值。

在本发明的第一方面，提供一种草菇菌种保藏的培养基制备方法，该方法包括：

(1)、稻草的碱-超声处理：将稻草茎段采用重量百分比为2-5％的氧化钙悬浊液处理，稻草茎段与悬浊液用量比为1:20以上，同时进行超声处理，超声结束后得到静置处理12-18小时，优选12小时；

(2)、培养基配制：将处理后的稻草茎段清洗并且灭菌，将稻草茎段排布在无菌培养皿中，从空隙处倒入重量百分浓度2-4％的琼脂溶液，优选2％，得到培养基。

优选的，在上述方法中，超声处理的条件为：温度30-40℃，超声频率40-60kHz，超声输出功率140-150W，时间30-60min。

进一步优选的，在上述方法中，超声处理的条件为：温度30℃，超声频率60kHz，超声输出功率140W，时间30min。

进一步优选的，在上述方法中，超声处理两次，间隔1小时。