[发明专利]一种检测抗体类药物与人体和动物正常组织交叉反应的方法

权利要求书

1.一种检测抗体类药物与人体和动物正常组织交叉反应的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)人体和动物组织标本的固定和包埋；

(2)人体和动物组织芯片的制备；

(3)人体和动物组织标本的切片与排布；

(4)抗体类药物的标记；

(5)采用免疫组织化学方法检测抗体类药物与人体和动物正常组织交叉反应。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，采集的步骤为：动物麻醉后摘取新鲜组织，剔除结缔组织和多余脂肪，用生理盐水冲掉残留的血液并用吸水纸吸净水分；人体组织采用活检组织或手术标本；

动物组织来源于以下种属：大鼠、小鼠、犬、狨猴、食蟹猴和恒河猴，每个种属单独取材并建立组织库。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述新鲜组织包括以下33种：

肾上腺Adrenal、胱Bladder、血细胞Blood cells、髓Bone marrow、乳腺Breast、小脑Cerebellum、大脑Cerebral Cortex、直肠Colon、内皮Endothelium、眼球Eye、输卵管Fallopian tube、胃肠道Gastrointestinal tract、心脏Heart、肾脏Kidney、肝脏Liver、肺脏Lung、淋巴结Lymph node、卵巢Ovary、胰腺Pancreas、甲状旁腺Parathyroid、垂体Pituitary、胎盘Placenta、前列腺Prostate、横纹肌Striated muscle、皮肤Skin、脊髓Spinal cord、脾脏Spleen、睾丸Testis、胸腺Thymus、甲状腺Thyroid、输尿管Ureter、子宫内膜Uterus、子宫颈Uterus；由以上组织构建组织库用于组织交叉反应试验。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，组织标本的固定方法至少为以下方法中的一种：

①石蜡组织

眼球和睾丸采用Dividson’s固定液，其余组织采用10％中性福尔马林。在室温下固定2周以上，按常规方法将组织进行石蜡包埋；

②冰冻组织

采用冰冻组织包埋剂OCT制备的步骤具体如下：

在金属包埋模具底部涂抹冰冻组织包埋剂，将组织的取材面朝向模具底面，将标注有脏器识别信息的包埋盒置于组织上，注入冰冻组织包埋剂OCT，将包埋模具放入液氮干冰中，静止1～3min，形成新鲜冰冻组织标本，保存于-60～-80℃冰箱。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，在载玻片1上制备组织芯片，其中，32种组织芯片以4*8的队列整齐排布，质控组织芯片位于其余32种组织芯片的队列以外的位置，所述的32种组织芯片不包括血细胞；用于制备组织芯片的组织包括石蜡组织或冰冻组织；切片厚度为3～7μm，冰冻组织芯片保存于-80℃超低温冰箱中，石蜡组织芯片保存于室温。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，将不同个体的同一种组织进行切片，并按照顺序依次呈线性排布在同一张载玻片1上，组织的数量为1～4个。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)中，用于单克隆抗体和同型对照标记的方法包括生物素、FITC或辣根过氧化物酶。