[发明专利]辣椒CMS三系杂交砧木的选育方法

权利要求书

1.一种辣椒CMS三系杂交砧木的选育方法，包括如下步骤：以甜椒雄性不育系2016-99A为不育系，甜椒保持系2016-99B为保持系，辣椒恢复系2016-99C为恢复系，进行三系配套选育，得到抗辣椒疫病、抗青枯病、抗南方根结线虫的砧木品种，实现辣椒CMS三系杂交砧木的选育；

所述辣椒恢复系2016-99C按照包括如下步骤的方法转育：

a）以辣椒CM334作母本，恢复系受体亲本辣椒N1508作父本，杂交，得到F1代群体；

b）以a）得到的所述F1代群体单株为母本，与所述恢复系受体亲本辣椒N1508进行4次回交，且每次回交产物进行抗辣椒疫病基因型检测和标记背景选择，分别从第1-3次回交产物中选取具有杂合抗辣椒疫病基因型且遗传背景回复率最高的10个单株作为下一次回交的亲本，从第4次回交产物中选取具有杂合抗辣椒疫病基因型且遗传背景回复率最高的10个单株作为中选BC4单株；

c）将所述中选BC4单株自交2次，且每次自交产物进行抗辣椒疫病抗性鉴定、所述抗辣椒疫病基因型检测和辣椒青枯病抗性鉴定，分别从第1-2次自交产物中选取抗辣椒疫病、抗青枯病且具有纯合抗辣椒疫病基因型的单株作为下一次自交的亲本，从第2次自交产物中选取抗辣椒疫病、抗青枯病且具有纯合抗辣椒疫病基因型的单株进行第3次自交，得到辣椒恢复系2016-99C；

所述甜椒雄性不育系2016-99A按照包括如下步骤的方法转育：

1）以甜椒胞质雄性不育系09-313A为母本，保持系亲本甜椒材料Charleston Belle为父本，杂交，得到F1代群体；

2）将所述F1代群体单株与受体亲本所述甜椒材料Charleston Belle进行6次回交，且除第一次回交外，每次回交产物进行所述标记背景选择，分别从第2-5次回交产物中选取遗传背景回复率最高的10个单株作为下一次回交的供体亲本，第6次回交产物即为甜椒雄性不育系2016-99A；

所述甜椒保持系2016-99B为甜椒材料Charleston Belle自交6代，得到的产物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述辣椒恢复系2016-99C转育方法中，所述抗辣椒疫病基因型检测的方法为用标记CA_011264对应的引物和标记Phyto5NBS1对应的引物分别对待测单株的基因组DNA进行KASP检测，所述标记CA_011264检测基因型为AA或AG或GG,所述Phyto5NBS1检测基因型为CC或CT或TT,若所述标记CA_011264检测的基因型是AG，且所述标记Phyto5NBS1检测的基因型为CT，则所述待测植株为杂合抗辣椒疫病基因型的单株；若所述CA_011264检测的基因型是AA，且所述标记Phyto5NBS1检测的基因型为CC，则所述待测植株为纯合抗辣椒疫病基因型的单株。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述标记背景选择的方法包括如下步骤：

先用多个筛选标记对应的引物对对所述待测植株、其对应的供体亲本和受体亲本的基因组DNA进行PCR扩增，选取该待测植株扩增产物中带型仅与受体亲本相同且与供体亲本不同的引物对对应的标记，记作受体亲本带型的分子标记；将多个筛选标记记作所参与分析的分子标记；

再计算待测植株分子标记的遗传背景回复率，公式如下：G（g）=[L+X(g)]/(2L)；其中，g指回交世代数，G（g）指在g代的遗传背景回复率；X（g）指在回交g代的待测植株的受体亲本带型的分子标记数量；L指所参与分析的分子标记数量；

再选取所有待测植株中分子标记的遗传背景回复率最高的10株为目标植株。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：

所述CA_011264标记对应的引物由序列1所示的引物、序列2所示的引物和序列3所示的引物组成；所述标记Phyto5NBS1对应的引物由序列4所示的引物、序列5所示的引物和序列6所示的引物组成。