[发明专利]HPLC测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯含量的方法

说明书

本发明公开了一种HPLC测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯含量的方法，包括以下步骤：(1)制备对照品溶液：取脱水穿心莲内酯对照品与乙醇制成对照品溶液；(2)制备待测样品溶液：精密取穿心莲片样品加乙醇稀释，制得待测样品溶液；(3)取对照品溶液高效液相色谱仪测定，建立脱水穿心莲内酯标准曲线；(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪测定，获得脱水穿心莲内酯的峰面积，从而根据标准曲线获得脱水穿心莲内酯含量；所述步骤(3)和(4)的色谱条件：4.6mm×150mm，5μm，Agilent Eclipse XDB‑C₁₈色谱柱；流动相：乙醇‑水＝65:35；流速：1.0mL.min‑1；检测双波长：254nm，进样量：10μL，柱温：室温，分离度：1.6，理论板数按脱水穿心莲内酯计大于2000。

技术领域

本发明涉及测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯含量的方法，尤其涉及一种HPLC测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯含量的方法。

背景技术

穿心莲片含穿心莲提取物，具清热解毒、凉血消肿之功效。临床用于邪毒内盛、感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、顿咳劳嗽、泄泻痢疾、热淋涩痛、痈肿疮疡、毒蛇咬伤等。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种HPLC测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯含量的方法。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种HPLC测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯含量的方法，包括以下步骤：

(1)制备对照品溶液：取脱水穿心莲内酯对照品与乙醇制成对照品溶液；

(2)制备待测样品溶液：精密取穿心莲片样品加乙醇稀释，制得待测样品溶液；

(3)取对照品溶液高效液相色谱仪测定，建立脱水穿心莲内酯标准曲线；

(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪测定，获得脱水穿心莲内酯的峰面积，从而根据标准曲线获得脱水穿心莲内酯含量；

所述步骤(3)和(4)的色谱条件：4.6mm×150mm，5μm，Agilent Eclipse XDB-C₁₈色谱柱；流动相：乙醇-水＝65:35；流速：1.0mL.min^-1；检测双波长：254nm，进样量：10μL，柱温：室温，分离度：1.6，理论板数按脱水穿心莲内酯计大于2000。

所述步骤(1)中，取脱水穿心莲内酯对照品适量，加乙醇制成含脱水穿心莲内酯16.6μg.mL^-1的对照品溶液。

所述步骤(2)中，取穿心莲片样品粉末0.05g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25mL，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10mL，加在中性氧化铝柱上，用乙醇20mL洗脱，收集洗脱液，置50mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得待测样品溶液。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

与现有技术相比，本发明提供的方法操作简单，高效省时，鉴定结果客观准确。

具体实施方式

实施例1

(1)制备对照品溶液：取脱水穿心莲内酯对照品适量，加乙醇制成含脱水穿心莲内酯16.6μg.mL^-1的对照品溶液。

(2)制备待测样品溶液：取穿心莲片样品粉末0.05g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25mL，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10mL，加在中性氧化铝柱(300目，5g，内径1.5cm)上，用乙醇20mL洗脱，收集洗脱液，置50mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得待测样品溶液。