[发明专利]一种雄蜂蛹小分子抗氧化肽的制备方法及其雄蜂蛹小分子抗氧化肽的应用

权利要求书

1.一种雄蜂蛹小分子抗氧化肽的制备方法，包括以下步骤：

1)将雄蜂蛹粉与水混合、匀浆，调节匀浆液的pH值为6～7后，与复合酶混合，在50～60℃下酶解1～3h，得到酶解液，所述复合酶包括内切蛋白酶和外切蛋白酶；

2)将所述步骤1)得到的酶解液进行离心分离，将得到的上清液进行过滤，得到滤液，所述离心分离的速度为4000～5000rpm，所述过滤使用滤布进行，所述滤布的孔径为1～5μm；

3)将所述步骤2)得到的滤液进行第一步超滤分离肽段，得到肽段分子量＜1ku的超滤液，所述第一步超滤依次使用的超滤膜的截留分子量为10ku、5ku、3ku和1ku；

4)将所述步骤3)得到的肽段分子量＜1ku的超滤液进行第二步超滤脱盐，得到截留液，所述第二步超滤使用的超滤膜的截留分子量为0.15～0.3ku；

5)将所述步骤4)得到的截留液减压浓缩后冷冻干燥，得到雄蜂蛹小分子抗氧化肽。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)复合酶的总酶活与雄蜂蛹粉的质量比为(1000～2000)U:1g，所述内切蛋白酶和外切蛋白酶的酶活比为(1～3):(1～3)。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)内切蛋白酶包括碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶中的一种或几种。

4.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述外切蛋白酶包括风味蛋白酶、羧肽酶和氨肽酶中的一种或几种。

5.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)雄蜂蛹粉的粒度为10～100μm。

6.根据权利要求1或5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)雄蜂蛹粉的质量与水的体积比为1g:(10～15)mL。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)离心分离的时间为10～15min。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)第一步超滤的条件包括：所述第一步超滤过程中滤液流速为0.5～10L/H，所述第一步超滤的膜元件压力为0～0.8MPa，在第一步超滤结束前加入纯水进行洗涤，直至流出的透过液为无色；

所述第二步超滤的条件包括：所述第二步超滤的流速为0.5～10L/H，第二步超滤的膜元件压力为0～1.2MPa，在第二步超滤结束前加入纯水进行洗涤，直至流出的透过液为无色。

9.权利要求1～8任意一项所述的制备方法制备得到的雄蜂蛹小分子抗氧化肽，所述雄蜂蛹小分子抗氧化肽的分子量为0.15～1ku。

10.权利要求1～8任意一项所述的制备方法制备得到的雄蜂蛹小分子抗氧化肽或权利要求9所述的雄蜂蛹小分子抗氧化肽在制备抗氧化药物和/或食品中的应用。